表达基因克隆技术与图谱构建策略的研究.docVIP

第五章 表达基因克隆技术与图谱构建策略研究 人类基因组计划的主要任务之一就是要从大片段基因组区域或整条染色体DNA 上 鉴定出基因表达序列(gene expressed sequences)或转录单位(transcription units)。在 人 类基因组30亿个碱基对中，发生转录的表达序列(即基因)仅占总序列的3～５％。基因组中 绝大部分是基因间隔序列(intergenic seguences)或 内含子(intron)和各种各样的重复序列。测定基因表达序列可直接鉴别人类目前认定的6～1 0万(或仅3～5万)个基因在染色体上的位置和排列顺序，这就是人类基因组计划所要构建的 第 四张图谱——基因表达图谱，又称基因转录图谱(gene expression maps or gene transcri ption maps)。 基因表达图谱是指细胞内所有染色体上表达基因的排列和分布，即指细胞中所有mRNA。目前 ，人们把很大精力投入到基因表达图谱的研究上，原因是表达基因序列是通过DNA序列的转 录本—mRNA反转录成互补DNA(complementary DNA,cDNA)获得的，即DNA外显子序列转录后形 成RNA，经过剪切形成mRNA之后，再将mRNA连接成模板，合成cDNA。因此，cDNA基因不包含 非转录的内含子序列，这大大减少了测序的工作量，加快了测序进度，并可以有目