山药多糖提取制备工艺与研究.docVIP

金 华 职 业 技 术 学 院 JINHUA COLLEGE OF PROFESSION AND TECHNOLOGY 毕业教学环节成果 （2011 届） 题 目 山药多糖提取制备工艺的研究 学 院 制药与材料工程学院 专 业 生物制药技术 班 级 学 号 201031100380131 姓 名 指导教师 2011年5月28日 金华职业技术学院毕业教学成果 目 录 摘 要 - 1 - 引 言 - 2 - 1 仪器与试药 - 3 - 1.1 仪器 - 3 - 1.2 试剂 - 3 - 2.2 样品溶液的制备 - 3 - 2.3 标准曲线的制备 - 3 - 2.4 山药多糖提取工艺过程 - 4 - 2.5 山药水溶性多糖提取工艺的确定 - 5 - 3 结果与讨论 - 6 - 3.1 山药多糖提取工艺条件的确定 - 6 - 3.1.1 料液比对山药多糖提取得率的影响 - 6 - 3.1.2 提取温度对山药多糖提取得率的影响 - 6 - 3.1.3 提取时间对山药多糖提取得率的影响 - 7 - 3.1.4 提取次数对山药多糖提取得率的影响 - 8 - 3.2 山药多糖提取工艺的优化 - 9 - 3.2.1 正交设计的因素和水平 - 9 - 3.2.2 试验设计及考察指标 - 9 - 3.3 醇沉工艺的优化 - 11 - 3.4 最优工艺实验验证 - 12 - 4 分析与结论 - 12 - 谢 辞 - 14 - 参考文献 - 15 - 山药多糖提取制备工艺的研究 金华职业技术学院生物制药技术 摘 要：目的：对山药多糖水提醇沉工艺进行研究，得出山药多糖的最佳提取工艺。方法：以山药总多糖为指标，采用分光光度法，单因素考察及正交设计试验法，对料液比、提取温度、提取时间、提取次数进行考察；并对醇沉浓度、醇沉时间和醇沉次数进行考察。结果：水提正交试验结果表明，料液比1:15，温度100℃，时间4h，提取2次为最佳工艺条件。醇沉正交试验表明，醇沉后溶液浓度为80%，时间为12h，醇沉1次。结论：该实验为山药多糖提取工艺的确定提供依据。 关键词：山药多糖、水提醇沉、正交设计试验法 引 言 山药既是一种珍贵的药用植物，又是一种常见的食物。山药为薯蓣科植物薯蓣(Dioscorea oppositaThunb.) 的干燥根茎[1]。山药性平,乃补益药中平稳之品。它平和的药性补而不腻,补而不滞,常在临床上收到意想不到的功效。山药是我国传统名方六味地黄汤的主药之一，李时珍在《本草纲目》中将其功用概括为“益肾气，健脾胃，止泻痢，化痰涎，润皮毛”五个主要方面[2]。现代医学研究表明,山药具有多种生物活性, 其中多糖被认为是主要功效成分。本研究旨在明确其化学成分以及含量，对山药多糖进行提取，以山药总多糖为指标，确定其制备工艺和质量控制方法，可进一步揭示山药的实用价值、利用潜力和经济价值，采用正交试验优化提取工艺，为山药的深入研究打下基础。 山药多糖是极性大分子化合物，易溶于水，不溶于乙醇，常用水作为提取溶剂。多糖水溶液浓缩后，加入95%乙醇，醇沉的醇浓度根据多糖的结构和性质而不同，一般在70%—85%的范围内，静置24h后，分取沉淀，然后进行去小分子杂质、去蛋白质、去色素等处理，水层再进行醇沉，沉淀分别用95%乙醇、无水乙醇、丙酮洗涤，60℃减压干燥。 植物多糖的提取一般根据多糖的特性，即多糖是极性大分子化合物，易溶于水或酸、碱、盐溶液，而不溶于醇、醚、丙酮等有机溶剂，其特点是从不同的材料中进行提取，即相似相溶原理。一般工艺是：原料水提离心醇沉干燥粗多糖。这是目前提取多糖最为常用的方法，本文采用水提醇沉的方法进行提取。 1 仪器与试药 1.1 仪器 旋转蒸发器（RE-52AA 上海亚荣生化仪器厂）；循环水式多用真空泵（SHB III 1.2 试剂 葡萄糖(产地:石家庄和平，批号110401 )、无水乙醇、95%药用乙醇、浓硫酸、苯酚均为分析纯，山药（产地河南省新乡市，安徽德昌药业饮片有限公司） 2 方法与结果 2.1 对照品溶液的制备 精密称取干燥置恒重的葡萄糖适量，置于250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为0.354mg/mL的葡萄糖标准溶液，备用。 2.2 样品溶液的制备 精密吸取山药饮片10.00g，加入95%乙醇100℃回流