空间植物组织培养与研究优化方法探讨.docVIP

张岳通讯方式： Tel: 021O) M) Fax: 021Email:lunna_zhy@163.com 空间植物组培养优化方法探讨 摘要 目前在空间飞行器或空间站中进行生物学实验的机会非常珍贵，搭载生物样品的培养容器一般来说都属于微小化的，因此在较小培养环境中如何将生物材料培养好是确保空间实验成功的一个重要前提。本实验采用Experiment Container（EC）]和实验室常用的培养皿。实验材料为拟南芥的愈伤组织。实验对培养基的激素配比，愈伤组织的接种重量和接种大小进行了优化。结果发现MS培养基中添加2,4-D 2mg/l，或者2,4-D和6-BA为1 mg/l 和0.1 mg/l时细胞生长状态较好。愈伤组织的接种重量为0.1g，接种直径为1mm时生长状态最好。在相对密闭的小环境中，空气交换不足是实验生物生长发育的主要限制因素。本实验发现在培养基中添加1%硝酸银和0.002 mg/l活性炭可以明显提高细胞对缺氧的耐受性。 关键词：空间飞行；组织培养。 引言 在最近的十多年中，由于建立月球或火星基地成为空间探索的重要目标之一，欧美等国已在积极开展以太空实验为目的，以及人类长期空间生活消费所必需的研究为目的，研究在空间培养或栽培植物，评估作物在空间产生种子的生长条件，筛选适合空间种植的植物品种，了解在没有重力和完全封闭条件下植物生长发育的主要问题等。尽管，目前在空间已进行了多次的植物生长试验，但是要在太空条件下成功地利用植物生产粮食与蔬菜等尚需解决包括重力在内的诸多与植物生长发育有关的环境因子的影响问题。植物生物技术的一个重要环节是在人工培养上培养植物细胞、组织。在去过30多年中，许多科学家都通过了植物器官培养、组织培养和细胞培养研究了空间微重力对植物细胞的生长、发育和繁殖的影响，并取得了许多重要的结果。随着分子生物学的研究进展，尤其是许多模式植物和农作物全基因组序列的测序完成，以及转录组学、蛋白质组学、代谢组学等组学的发展，标志着生物学研究已进入了后基因组生物学时代， 微阵列分析和蛋白质组学等的分子生物学技术也已经开始用于空间生物学研究。随着载人航天的纵深发展，空间站的建立、月球探测、火星和小行星的探测也成为了人类探测宇宙的未来发展规划，也预示空间生物学研究的无限美好前景。但是，目前空间飞行实验的机会非常稀少而又非常宝贵，在空间实验中，往往实验条件有限， 美国NASA常用的细胞培养容器有以下几种: Cell Culture Module (CCM)，该系统可供多种生物学样品进行培养可变温可为药物激素放射性标签及其他实验所用/mission_pages/station/science/experiments/ CCM-Wound_Repair.html)。Single Loop for Cell Culture （SLCC），SLCC的容积为10毫升。一般6个SLCC装在一个中，可进行细菌和各种细胞培养(/pdf/360387main_HO1b_Aurora.pdf)。Biotechnology System (BTS)，BTS是在空间站中用于组织培养，蛋白晶体生长等生物学实验的容器。通过BTS的窗户可以看到里边的生物反应器。科学家曾用BTS研究过空间环境中软骨组织的生长情况。欧洲ESA常用的生物培养容器为the European Modular Cultivation System (EMCS)，即可以用于短期飞行实验，又可用于长期的空间站实验。EMCS中有数个实验单元Experiment Container (EC)，每个EC大小为60×60×160mm，实验单元中的样品培养可以根据需要来添加LED灯光等（Brinckmann 等，2005）。2000年瑞士研究人员研制了一微型空间细胞培养装置(SBRI) ，其外形尺寸为87mm×63 mm×63 mm，专门用来研究剪应力对细胞生长的影响walther等，2000）。65毫升，大小为81毫米×40毫米×20毫米。另一种内部容积为385毫升，其大小为87毫米×63毫米×63毫米)。这些标准容器已经多次在空间进行过哺乳动物细胞、细菌、鱼、植物和小昆虫的飞行实验（吴汉基×140mm×64mm。目前不管是美国欧洲还是，生物样品培养实验所能提供的空间都非常有限在有限的空间内如何提高生物样品的培养效率是空间实验能否取得成功的一个前提条件。本实验的容器包括培养基组成、愈伤组织大小、愈伤组织重量等 实验材料 拟南芥愈伤组织细胞：悬浮培养7天后，接种于固体培养生长14-21天之间的愈伤组织 培养基：MS+3%蔗糖+ 200-300 mg 水解酪蛋白+0.8%琼脂+激素，pH 5.8-6.0 实验方法