NP-1在小球藻硝酸还原酶缺失突变体中表达与活性检测.pdfVIP

NP-1在小球藻硝酸还原酶缺失突变体中表达与活性检测.pdf

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农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2008,16 (4): 635~641  ·研究论文 · 在小球藻硝酸还原酶缺失突变体 中的表达与活性检测 *  , 1 2 2 2 2 2 2 1 2 2 ** 安 洋  ,赵世 民  , 孙勇如  ,白丽莉  ,尹维波  , 陈宇红  ,李元广  , 胡 军  ,胡赞民  1. 200237 ( 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 , 上海 ; 2. 中国科学院遗传与发育生物学研究所分子农业研究中心 , 北京 100101) 摘要:研究构建了兔 防御素基因 的植物表达载体 , 由 启动子控制,含 基 因和硝酸还原酶基 因 2个筛选标记 。 以椭圆小球藻(  )硝酸还原酶缺失突变体 为受体, 采用原生质体转化 的方法将目的基因 用含 G418 , 经 PCR RT­PCR 。 转基 因 转入该突变体中。 的硝酸盐培养基筛选出 阳性藻落 和 检测, 证明获得 了转基因藻株 藻株在无抗生素筛选压力的硝酸盐液体培养基上继代培养后进行抑菌活性检测。 结果表明, 转基因椭圆小球藻表达的 NP­1具 有正常的生物活性, 并在无抗生素的培养基 中稳定遗传 。研究 的结果为小球藻表达外源基 因提供 了新的技术途径 , 也使 NP­1 的规模化生产成为可能。 : ; 关键词 椭 圆小球藻; 硝酸还原酶缺失突变体 中图分类号: S188  文献标识码: A  文章编号: 1006­1304(2008)04­0635­07  Expression andBioactivity Characterization of  in TransgenicNitrate  ReductaseDeficientMutant of  , 1 2 2 2 2 2 ANYang  ZHAO Shi­min  SUNYong­ru  BAILi­li  YINWEI­bo  , , , , , 2 1 2 2  CHENYu­

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