15d-PGJ2对肾小管上皮细胞CD40及RANTES表达影响.pdfVIP

15d-PGJ 对肾小管上皮细胞CD40 及RANTES 2 表达的影响1 ▲ 张亚杰 阳晓 张云芳 陈伟英 孔庆瑜 董秀清 李晓艳 余学清 中山大学附属第一医院肾内科(510080广州) E-mail: yangxiao_999@ 摘 要：目的 观察过氧化物酶体增殖物激活受体 γ（PPARγ）激动剂 15d-PGJ 对 γ-干扰素 2 （IFNγ）和肿瘤坏死因子α （TNFα）诱导的人近端肾小管上皮细胞 （HK-2）CD40 和RANTES 表达的影响。方法 体外培养人近端肾小管上皮细胞株，分组如下： （1）正常对照组； （2） IFN γ（50μg/ml）组； （3）TNFα (10ng/ml)组； （4）IFN γ（50μg/ml ）＋TNF α(10ng/ml) 组；(5)IFN γ （50μg/ml）＋TNF α(10ng/ml)分别加 1、3、5μmol/L 15d-PGJ2组；(6)IFN γ+TNFα刺激＋15d-PGJ2 (5 μmol/L) ＋GW9662 （PPAR γ特异拮抗剂 ）1μmol/L组。GW9662 和 15d-PGJ2分别在IFNγ和TNFα刺激前 3h 和 2h加入。分别采用RT-PCR、流式细胞仪 （FACS） 和酶联免疫法（ELISA ）检测CD40 和RANTES基因和蛋白的表达水平。结果 正常HK-2 细胞中， CD40、RANTES 有基础水平表达。IFNγ能显著上调HK-2 细胞CD40 蛋白的表达；TNFα单独刺 激对CD40 表达无显著影响，但能增强IFNγ的刺激效应。IFNγ＋TNFα显著增加HK-2 细胞 RANTES的表达和分泌。15d-PGJ2呈剂量依赖式在基因和蛋白水平显著抑制IFN γ＋TNFα诱导 的CD40和RANTES的表达。加入PPAR γ特异拮抗剂GW9662 后，能够部分逆转 15d-PGJ2对CD40 和 RANTES表达的抑制效应，但并不能完全阻断其作用。结论 15d-PGJ2部分通过PPAR γ介导的 信号途径参与抑制IFN γ+TNFα诱导的人近端肾小管上皮细胞CD40 和RANTES的表达，从而发 挥免疫调节和抗炎效应。 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体 γ；肾小管上皮细胞；CD40；RANTES 1 引言 近端肾小管上皮细胞作为一种非经典的抗原递呈细胞,不仅是肾小管-间质炎症损伤过 程中的受害者，而且是肾小球疾病炎症瀑布效应的中心细胞。激活的肾小管上皮细胞可通过 分泌多种炎症介质介导和/或加剧肾组织病理损害，直接影响到肾脏疾病的预后[1]。共刺激 信号CD40/CD40配体（CD40L）和激活正常T细胞表达和分泌因子(regulated upon on activation on normal T cell expressed and secreted, RANTES )在参与T细胞活化的调 节、肾脏局部炎症反应中起重要作用[2,3]。过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）是一 类配体依赖性核转录因子超家族成员之一，近年研究发现其在免疫调节、炎症反应中发挥着 重要作用[4,5，6] 。15-脱氧前列腺素J 是PPARγ内源性天然激动剂。本研究旨在探讨15d-PGJ 对 2 2 体外培养人近端肾小管上皮细胞株（HK-2）CD40及RANTES表达的影响。 基金项目：国家自然科学基金 30572290)； 教育部博士点专项基金(2002055805)；广东省 重点攻关项目 (2003C30202)资助。1 ▲通讯作者 - 1 - 2.材