第七章 受体细胞.pptVIP

与Southern印迹杂交不同之处： RNA电泳 避免单链RNA自身形成高级结构和自身降解 变性凝胶电泳(甲醛、尿素、甲酰胺等) RNase抑制环境 3. 菌落(或噬菌体)原位杂交 1975年，M.Grunstein和D.Hosness提出菌落原位杂交 1977年，W.D.Benton和R.W.Davis噬菌斑原位杂交 不必分离细菌或噬菌体DNA, 经溶菌和变性处理 后，使DNA暴露出来并于滤膜结合 印迹 碱处理； 烘烤 加入探针 3. 核酸杂交的探针 (1)常用探针类型： ①同源或部分同源 19-24bp ②总cDNA探针 ③特异cDNA探针 ④人工合成寡核苷酸探针 (2)探针标记物 ①放射性标记物 32P 高放射性 半衰期14.3 d 35S 放射性较弱 半衰期87.1 d 3H 放射性弱 半衰期12.35 a ②非放射性标记物 生物素(biotin) 地高辛(digoxigenin) Biotin Avidin B