股蓝泼尼松片对博莱霉素致大鼠肺纤维化早期治疗机理的初探.pdfVIP

中文摘要 股蓝泼尼松片对博莱霉素致大鼠肺纤维化早期 治疗机理的初探 中文摘要 fibrosis)可由多种病因引起，但病理演变大多表现为 目的肺纤维化(pulmonary 初始的下呼吸道炎症细胞浸润，肺泡上皮和血管内皮细胞的损伤，伴有成纤维母 细胞和Ⅱ型肺泡细胞增殖的细胞因子等的释放，致细胞外基质蛋自和胶原沉积， 最终引起肺部结构的损害。据流行病学调查，病人的发病年龄通常在50一70岁 之间，年发病率在万分之7—10，平均存活率不到3年(自诊断为纤维化时起)， 而且随着年龄的增长，其发病率和死亡率也升高。直至今日，IPF治疗尚无特效 药物。因此，研究肺纤维化发病机制，并在此基础上发展新的治疗方案及寻找行 之有效的治疗药物具有十分重要的意义。 IPF过程中，肺炎症细胞(主要为中性粒细胞、巨噬细胞)、肺泡上皮细胞 (AEc)、肺间质细胞(如成纤维细胞)、肥大细胞和内皮细胞等通过分泌细胞因子、 炎性介质等生物活性物质，发挥直接或间接的作用．其中，占肺泡腔细胞的9096 以上的肺泡巨噬细胞(AM)，是肺内重要的防御细胞。大量的研究结果显示，在参 与肺纤维化发生发展的多种细胞中，活化的AM在纤维化起始及进展过程中的作 用可能最为关键。AEC内衬于肺泡腔，是构成肺泡壁屏障的主要细胞，矽尘可直 接作用或通过^M产生的生物活性介质间接作用于AEC而引起肺部的炎症反应。 肺成纤维细胞是肺内合成ECH的主要细胞，激活的肺成纤维细胞释放许多炎症介 质来参与肺纤维化的发生。此外，激活的AM分泌的大量炎性因子作用于肺成纤 维细胞，可使之增生、活化。由于在IPF的损害区有中性粒细胞、嗜酸粒细胞、 巨噬细胞、淋巴细胞等的浸润，并有多种细胞因子和炎症介质等的释放，故多认为 IPF是继发于一炎性过程的肺部结构重建，提示可针对炎症过程的各个环节给予 治疗。 七叶胆、小苦药、公罗锅底、边地生根，味苦、性寒、无毒。本品在明代《救荒 表明，绞股蓝总甙具有抗氧化，降血脂，抗肿瘤等药理作用。本课题即针对肺纤维 化早期肺泡炎症的病理状态，分为7、14天两个时间点动态观察了肺纤维化早期 过程中“股兰蓝泼尼松片”对气管内注射博莱霉素诱导的大鼠纤维化模型的影响。 方法实验研究分为四个部分： 1、股蓝泼尼松片对BLM致大鼠肺纤维化早期防治作用的药效学研究 1．1股蓝泼尼松片对BLM致肺纤维化大鼠肺系数的影响 本实验通过对模型动物肺系数的测定，观察股蓝泼尼松片对肺纤维化模型大 鼠的影响。 SD雄性大鼠154只，分为7组，7天、14天两个取材时间。分组情况为假手 2 殷蓝泼尼橙片对博莱霉素致大鼠肺纤维化早期治疗机理的初探 术对照组、模型对照组、泼尼松对照组，绞股蓝总皂甙对照组、股蓝泼尼松片 高剂量组、股蓝泼尼松片中剂量组、股蓝泼尼松片低剂量组等7个组，每组11 只。假手术大鼠气管滴注生理盐水，其余各组大鼠气管漓注0．3ml的博莱霉素生 理盐水溶液(1ml／2009)。大鼠造模24小时后，股蓝泼尼松片高、中、低剂量组， 泼尼松组及绞股蓝总皂甙组分别灌服股蓝泼尼松片药粉混悬液(O．269／kg、 (0．249／kg)，假手术组、模型组分别灌服等体积的生理盐水。分别于实验造模后 第7天、14天末次给药后2小时，随机取每组各8只大鼠，称重后以无菌操作 完整分离出气管和双肺，去除周围结缔组织，用预冷却的PBS仔细冲洗后滤纸 吸干，电子天平称肺湿重，计算肺系数。这是反映肺纤维化程度的指标之一。 100％ 公式为：肺系数=肺重(nag)／体重(g)X 1．2股蓝泼尼松片对BLM致肺纤维化大鼠肺组织羟脯氨酸(HYP)含量的影响 肺纤维化的特点是细胞外基质过度沉积，肺中B嘣合成的速度大于降解的速 度，胶原纤维显著增多，最终导致胶原的逐渐积累。羟脯氨酸为胶原纤维中特有 的一种氨基酸衍生物，其含量的测定成为间接反映胶原含量的的敏感指标而被广 泛应用于肺纤维化的研究，而通过羟脯氨酸测算胶原蛋白的含量，一方面可以直 观的反映胶原代谢的情况，判断纤维化的程度，同时可以为筛选预防与治疗的药 物提供依据。本实验通过对模型动物肺组织羟脯氨酸(HYP)含量的测定，观察 股蓝泼尼松片对肺纤维化模型大鼠的影响。 分组处理同实验1。分别于实验造模后第7天、14天末次给药后