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HBV血清标记物与HBVDNA相关性分析.pdf

HBV 血清标记物与HBVDNA 相关性分析 罗斌,韦叶生,曾永龙,滕元姬,黄玮 右江民族医学院附属医院检验科,广西百色 (533000 ) E-mail: lblb88988@163.com 摘 要:目的:了解荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR )技术定量检测HBV-DNA 与乙型肝 炎病毒免疫学标记物的相关性。方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA )法测定乙肝病毒患 者乙肝病毒(HBV )两对半,用FQ-PCR 法检测HBV-DNA 含量。结果 HBsAg 、HBeAg 、 HBcAb 阳性组和HBsAg 、HBeAg 阳性组HBV-DNA 检出率较高,分别为93.8%和 100%, 病毒含量分别为,4.8×106 6 copies/ml 和2.2×10 copies/ml。血清中HBeAg 与HBVDNA 含量密 切相关。结论 血清学标志物难以判断 HBV 的复制程度和传染性强弱,FQ-PCR 检测 HBVDNA 能准确地反映体内的HBV 真实感染和复制情况,为临床的诊断和治疗提供科学 的依据。 关键词:乙型肝炎病毒;荧光聚合酶链反应;HBV-DNA HBV 血清标记物检测是乙型肝炎病原学诊断的指标,包括HBsAg 、HBsAb 、 HBeAg 、 HBeAb 和HBcAb 五项指标,是目前诊断乙型肝炎最常用的指标,他主要反映人体对乙肝病 毒的免疫状态,不能直接反映HBV 在患者体内的复制与传染情况。荧光定量聚合酶链反应 (FQ-PCR )具有较好的特异性和灵敏度。可直接检测血清中HBV-DNA 复制情况,能区别 诊断乙肝的早期感染、现症、恢复期感染,也能对乙肝的突变株进行诊断[1] 。有利于对临床 HBV 感染程度的判断、治疗方案的选择及疗效的判定。本实验采用 FQ-PER 定量检测 255 例乙肝患者,同时用 ELISA 法进行检测,并对结果进行比较和相关性分析。现将结果报告 如下。 1. 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 标本来源 255 例慢性乙肝患者均为我院感染科住院及门诊病人,所有标本表面抗原阳性,诊断符 合2000 年9 月中华医学会传染病与寄生虫病学会分会、肝病学会联合修订的“病毒性肝炎防 治方案”修订的诊断标准[2] 。其中男性153 例,女性102 例,年龄16-70 岁。平均年龄38 岁。 空腹抽血,及时分离血清,-20 ℃保存,不超过7d 进行FQ-PCR 。 1.1.2 检测试剂 HBV 血清标记物的检测试剂盒购于珠海丽珠试剂有限公司,荧光定量聚合酶链反应试 剂盒由中山大学达安基因股份有限公司提供,严格按照标准操作程序进行。 1.1.3 仪器 美国ABI7300 荧光定量PCR 仪,酶联免疫检测实验所用酶标仪为美国雷杜RT-6000 全 自动酶标仪,洗扳机购自北京普朗新技术有限公司,型号为DNX-9620A 。 1.2 方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA )检测 HBV 血清学标志,用荧光定量聚合酶链反应 (FQ-PCR )检测HBVDNA 。 - 1 - 1.3 荧光定量结果判断标准 3 3 HBV-DNA 定量以 1×10 copies/ml 为判断阳性标准,<1×10 copies/ml 阴性,> 3copies/ml 为阳性。 1×10 1.4 实验分组 用ELISA 法分别对255 份血清进行HBV 血清标记物检测(血清标记物HBsAg 、HBsAb 、 HBeAg 、 HBeAb 、HBcAb 分别编号为 1、2 、3

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