高效液相色谱法测定黄体酮,酸睾酮及丙苯甲酸雌二醇含量.pdfVIP

2003，37(12)：19—21／周艳飞 中国兽药杂志 ·l9 · 高效液相色谱法测定黄体酮、丙酸睾酮及 苯 甲酸雌二醇含量 周艳飞 (北京市兽药监察所 ，北京 100012) [收稿 日期]2003—08—20 [文献标识码]B [文章编号]1002—1280(2003)l2—0019—03 [中图分类号] TQ460．72 [摘 要] 采用高效液相色谱法测定复方丙酸睾酮注射液中黄体酮、丙酸睾酮及苯 甲酸雌二醇 含量。色谱柱为c 柱；流动相为甲醇一水(82：18)；检测波长为230nm。在同一种检测条件下能 同时测定3种组分的含量，在各 自的浓度范围内均具有 良好的线性关系(r=0．9999)。本法简 便准确，可用于3种组分的含量测定。 [关键词] 黄体酮；丙酸睾酮；苯甲酸雌二醇；高效液相色谱法 复方丙酸睾酮注射液为激素类药物，成分为每 溶解后稀释至刻度，摇匀。浓度为1．535mg／mL。 1mL中含丙酸睾酮 12．5mg，黄体酮 6．5mg，苯 甲 2．3 对照品混合贮备液的制备 丙酸睾酮对照品 酸雌二醇 1．5mg，主要用于家畜发情 ，应用范围较 25．60mg，黄体酮原料 l3．46mg，置同一 100mL量 广。本文采用高效液相色谱 (HPLC)法测定3种组 瓶中，加 甲醇适量溶解 ，再精密加入苯 甲酸雌二醇 分含量 ，操作简便 、准确 ，结果令人满意。 贮备液2mL，加 甲醇稀释至刻度 ，摇匀。浓度为丙 1 实验材料 酸睾酮0．256mg／mL，黄体酮0．1346mg／mL，苯 甲 1．1 仪器 高效液相色谱仪 Waters2695；紫外检 酸雌二醇 0．0307mg／mL。 测器 Waters2487。 2．4 对照品溶液的制备 精密量取对照品混合贮 1．2 药品 丙酸睾酮对 照品，含量 100％，批号 备液3mL，置 50mL量瓶中，加 甲醇稀释至刻度 ，摇 008-9404，中国药品生物制 品检定所提供；苯 甲酸 匀。3种组分浓度分别为丙酸睾酮 l5．36~g／mL， 雌二醇对照品，含量 100％，批号 006-9703，中国药 黄体酮8．076~g／mL，苯 甲酸雌二醇 1．842~g／mL。 品生物制品检定所提供；黄体酮原料 ，含量96．9％； 2．5 供试品溶液的制备 精密量取复方丙酸睾酮 丙酸睾酮原料 ，含量98．9％；苯 甲酸雌二醇原料 ，含 注射液2mL，置 100mL量瓶中，加 甲醇适量溶解后 量99％；复方丙酸睾酮注射液，批 号 稀释至刻度 ，摇匀。再精密量取 3mL，置 50mL量 2oo20903，北京立时达药业有 限公司提 瓶中，加 甲醇稀释至刻度 ，摇匀。浓度为丙酸睾酮 供。 15~g／mL，黄体酮 7．8~g／mL，苯 甲酸雌 二醇 1．3 试剂 甲醇，色谱纯 ，天津市四友生物医学技 1．8 ~g／mL。 术有限公司；重蒸馏水。 2．6 回收样品溶液的制备 按照配方制备小样 5 2 方 法 份，分别称取 3种原料 ：丙酸睾酮 25mg、黄体酮 2．1 色谱 条件 色谱柱 为 C，柱 (3．9mm × 13mg和苯 甲酸雌二醇 3mg，置 同一 100mL量瓶 150lnln)；流动相 为 甲醇一水 (82：18)，流速 为 中，加丙二醇 2mL，加 甲醇适量溶解后稀释 至刻 1mL／min；检测波长230mm；进样体积20 L。 度 ，摇匀，再精密量取3mL，置 50mL量瓶 中，加 甲 2