苏木素染液的配制与染色影响因素.pdfVIP

苏木素染液的配制与染色影响因素 胡锦林，吴 伟 (浙江省肿瘤医院，浙江杭州310022) of SolutionandIts PreparationHematoxylinStaining Influencing FactorsonStaining HU Wei Jin—ling,WU 摘 要：该文就苏木素染液的配制及对苏术素一伊红染色相关流程 液纠正。目前推荐使用10％的中性缓冲福尔马林。⑤组织脱 和不利染色的因素进行探讨。， 水对染色的影响。，组织脱水不当，可造成细胞核着色不清。⑥ 主题词：苏木素；染料：病理学 分化与蓝化对染色的影响：分化是HE染色的关键，分化液浓 中图分类号：R361+．2文献标识码：B 文章编号：1671—170X(2005)04—0319一01 度不宜过高，因浓度过高会使分化程度难以控制和出现脱片 现象。一般常用0．5％～1％盐酸乙醇分化，镜下控制，以核着色 苏木素一伊红染色．是病理工作中常规经典的染色方法， 深，且胞浆不着色为佳。分化后，应立即流水冲洗，防止残留 在各级医院及组织学实验室中普遍使用，其操作简便，结果 分化液继续脱色。蓝化须彻底，否则宜出现核不鲜艳，略带紫 稳定．不易褪色。制备一张高质量的HE切片应显示出不同的 红色，蓝化液以流水冲洗蓝化为好，若用弱碱液蓝化．亦应流 组织结构特征，包括上皮、结缔组织、神经和肌组织以及病原 水洗净。否则，会使伊红着色不佳或日久褪色。⑦染液温度对 菌等，并能做到厚薄均匀，色彩鲜艳，对比清晰，组织透明度 染色的影响：温度越高染色时间越短．一般不宜加温，以免影 好。为了达到这个目的．必须在正确选用苏木素一伊红染料的 响染液使用寿命。特殊情况除外。 同时．对其染色相关流程和不利染色的凶素进行综合考虑。 3 伊红染液 1苏木素的配制 常用伊红分Y、B两种。伊红Y最常用，伊红Y分水溶性 和醇溶性两种。醇溶性伊红Y着色较佳，胞浆鲜艳，水溶性伊 其方法甚多，Harris苏木素配制法为应用最广泛的方法 之 ，其配制要点包括：①氧化汞的选择。传统Harris苏木素红Y较易褪色，故推荐使用前者。 液，通常使用黄色氧化汞氧化，因经常m现苏木素结晶及着 4 HE染色常见问题处理 色不强的缺点，故我们改用红色氧化汞，目的不但增强核的 脱片：①玻片不洁，有油污。处理：清洁载玻片。②切片质 染色能力，而且减少苏木素结晶产生，效果较好。②减少氧化 量差，烤片时问或温度不足。处理：提高切片质量，延长烤片 汞和冰醋酸的用量。我们使用500ml苏木素染液加1．19的氧 时间，注意烤片温度(70℃左右)。⑧贴片水温太低，未摊平切 化汞和4％的冰醋酸，实践证实可延长苏木素的使用寿命。⑧ 片与载玻片粘贴不够紧。处理：提高贴片水温。④组织本身易 配制流程中的两个关键。一是苏木素乙醇溶液和明矾液混合 脱落，如血块。处理：使用白胶片，且延长烤片时问。⑤组织同 后．应立即加热至沸腾：二是氧化汞投放速度不宜过慢，以免 定后未能充分水洗。处理：组织同定后必须充分水洗，补救措 氧化不全。此时尤应注意安全，以防溶液外溢，甚至发生意 施：可使用白胶片，且延长烤片时间。⑥组织切片留置酸碱液 外。应要求使用大容积烧瓶，并控制好电源。④为了避免苏木 时间过长。处理：分化、蓝化时，控制溶液浓度的同时，蓝化宜 素过度氧化，最好在临用前配制．染液冷却后不宜在空气中 选择流水．避免氨水促蓝。⑦应避免流水冲洗蓝化太猛，控制 暴露时间过长，一般可用瓶塞封口。 水量。 2影响苏木素染色的因素