低温微生物脂肪酶的研究进展.pdfVIP

吏1 [摘 要l低温条件下徽生物脂肪醉具有高效、封热、作用周期短等优势.其独特的低温适应机制是中高温脂肪醉无法替代的，并 在许 多领城得到了广泛的应用。本文从微生物脂肪酶的功能、筛选的影响因素、结构特征和化学修饰、诱变和提取分离方法、固定 化、研究现状进行 了论述，这对于广大的科研工作者具有一定的参考价值。 [关键词」低温微生物脂肪酶;功能;诱变;提取和分离 1、微生物脂肪酶的功能和研究历史 假丝酵母的酶分子中则含有木糖和甘露搪; 白腐真菌酶中含有 7%的 脂肪酶(Iipase,EC3.1.13 ，甘油醋水解酶) ，分解生物产生的各种天 碳水化合物 ，主要是甘露糖;综合说来，大多数微生物产生的脂肪酶是 然的油和脂肪，是一类特殊的酷键水解酶，主要水解由甘油和 12 碳原 糖蛋白。目前国内外已研究出适合 日化和纸墨加工中耐高温耐碱性的 子 以上的不溶性长链脂肪酸形成的甘油三酷 ，催化的反应式是三酸甘 脂肪酶，并已投人生产，脂肪酶的催化性能都有大幅度的提高，许多基 油醋和水在脂肪酶的作用下生成二酸甘油醋和脂肪酸 。其另一个催 因工程菌所产生的脂肪酶在高达90 度的环境中生存周期达到 120 小 化特征功能是一种专门在异相系统油水界面上水解特殊酷类的酶，对 时以上。低温微生物在很大程度 上合成了含有更多不饱和脂肪酸或短 均匀分散的或水溶性底物不起作用 ，以底物甘油三酷中 1位或3 位和 链脂肪酸，使得细胞膜的流动性增强，从而有利于细胞 内外的物质交 2 位酷键的识别和水解反应性 一酷键位置专一性最为关键 ，这是脂肪 换 。 酶区别于MH酶的一个特征。脂肪酶广泛存在于各种动植物的组织中和 4 、低温微生物脂肪酶的结构特征和化学修饰 各种微生物中，它是最早研究的酶类之一，动植物脂肪酶于十九世纪 非水介质中酶的结构与功能关系的研究是筛选具有前景的长效高 被首次报道 ，而微生物脂肪酶则是在本世纪被发现和研究当中，几乎 活性酶的重要基础工作。在 目前测定非水介质中酶结构的方法中， 所有的微生物都有合成脂肪酶的能力，只是合成的能力不同而已，由 FT-IR是一种测定非结晶固体酶分子二级结构的理想方法，但由于受 于微生物脂肪酶种类多，来源广 ，周期短 ，作用高效，具有比动植物脂 水分子的强烈干扰，通过分析光谱中酞胺I 区定量解析各种二级结构 肪酶广的PH 值 ，作用温度范围和对底物的专一性类型，又便于进行 的含量有相当的困难，必须用重水代替水作为溶剂，这是一般酶结构 工业化生产和获得纯度制剂，所以比动植物脂肪酶在酶理论研究和实 分析分离纯化中难以做到的，随着现代测量仪器的高灵敏度和较高的 际应用中有着更为重要的作用.近五年来 ，仅被 DERWERT 生物技术 分辨率，现代计算机解析程序的介人，我们可以利用反映蛋白质分子 文摘收录的脂肪酶文献就多达4001) 多篇，其中 日本、美国的专利文献 红外光谱的另外一个区域酸胺 III 区对蛋白质的二级结构进行定量分 占了近1/4,涉及有机合成、制药、油脂加工、轻化等众多行业，充分另 析成为可能，目前文献报道的利用酞胺III 区对蛋白质二级结构进行 示了其巨大的应用潜力。 分析，局限在几种商品化的蛋白质上，并且仅仅考查了完全干燥脱水 2 、产低温微生物脂肪酶菌株的筛选 后的空间结构变化 ，并未见到结构与功能关系报道，我们可以对纯化 根据相关文献报道，产微生物脂肪酶菌种的研究主要集中在根 的脂肪酶在冻干过程中空间结构是如何变化的. 存在什么样的特点， 酶Rhizop s 、曲霉Aspergill s 、青酶Penicilli m、毛酶M cor 、须霉 对酶分子发挥催化功能起重要作用的体系微环境如温度，PH 值，盐浓 Phycomycer ,链霉菌Streptomyces 、色杆菌Chro mobacteri m, 无色杆菌 度条件，对脂肪酶的二级结构有何影响进行了可行性研究。我们对青 Ach