‘红巴梨’果皮UFGT基因的克隆及表达分析.pdfVIP

西北植物学报 ，2010，30(I)：0030—0034 ActaBot．Borea1．-Occident．Sin． 文章编号 ：1000—4025(2010)01-003005 红‘巴梨 ，果皮 UFGT基 因的 克隆及表达分析 李俊才 ，李天忠。，王志刚。一，李宝江 (1沈阳农业大学 园艺学院，沈阳 110161；2辽宁省果树科学研究所 ，辽宁熊岳 115009；3中国农业大学 果树细胞与分子育种实 验室，北京 100193；4中国农业科学院 果树研究所 ，辽宁兴城 1251oo) 摘 要 ：以 巴‘梨 ’红色芽变 品种 红‘巴梨 ’果皮为材料 ，采用 同源克隆技术和 RACE结合 的方法 ，克隆了UFGT (UDP一葡萄糖 ：类黄酮 3一()I葡萄糖基转移酶)蛋 白的部分 cDNA，命名为 PcUFGT。结果表明：该 cDNA片段长为 1089bp，与苹果 UFGT基 因序列一致性达 89 ，氨基酸序列 同源性为 85 ，含有糖基转移酶 的 UDPGT、 COG1819和 MGT等保守域 。荧光实时定量 PCR分析表明，该基 因在 红‘巴梨 ’幼果期表达强度约为 巴‘梨 ’的2 倍 ，而果实成熟期表达强度略低于 巴‘梨 ’；该基 因在 红‘巴梨 ’果 肉中不表达 。 关键词 ：红 巴梨 ；红色果皮；UDP一葡萄糖 ：类黄酮 3—0一葡萄糖基转移酶；基因克隆；表达分析 中图分类号 ：Q789 文献标识码 ：A CloningandExpressionofUFGT GeneinSkinofM axRedBartlett LIJun—cai。LITian—zhong。，WANG Zhi—gang。，，LIBao—jiang。 (1CollegeofHorticulture，ShenyangAgriculturalUniversity，Shenyang 110161，China；2LiaoningResearch InstituteofPomolo— gY，Xiongyue，IAaoningl15009，China；3LaboratoryofFruitCellandMolecularBreeding，ChinaAgriculturalUniversity，Beijing 100193，China；4FruitTreeResearch Institute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Xingcheng，Liaoning125100，China) Abstract：By themethodsofhomologouscloneand rapid amplification ofcDNA ends (RACE)，acDNA fragmentofUFGT (UDP—glucose：flavonoid3-0一glucosyltransferase)genewasclonedfrom M axRedBart— lett(ared—skinsportofBartlett)，wenameditaspcUFGT．Theresultsofsequenceanalysisshowedthat thiscDNA fragmentincludes1089basepair：Thesim ilaritybetweenthiscDNA fragmentandappleUFG丁 geneis89 ，and theglycosyltransferasessuperfamilyconserved domain suchasUDPGT，COG1819and M GT 。hasbeenfoundintheaminoacidsequenceofthecDNA fragmentcloned．Bythemethodofreal—time quantitativePCR ，pcUFGT geneexpressingmodeinBartlettandM axRedBartlettwasanalyzed．There— suhsshowedthattheexpressintensity in early red Bartlettwasdoubleoftheexpressintensityin early Bartlett，butinr