Bt基因转入烟草叶绿体获得转化植株的研究.pdfVIP

第 33 卷 湖南农业大学学报 ( 自然科学版) Vol 133 2 007 年 8 月 J our nal of Huna n Agricultural U niver sity (Natu ral Sciences) A ug12 007 Bt 基 因 转 入 烟 草 叶 绿 体 获 得 转 化 植 株 的 研 究 1 2 1 1 1 3 丁玉梅 , 杨正安 , 周晓罡 , 张绍松 , 孙茂林 ( ) 11 云南省农业生物技术重点实验室 , 云南 昆明 　650223 ; 21 云南农业大学 园林园艺学院 , 云南 昆明　6 5020 1 摘 　要 : 构建了苏云金杆 菌晶体毒 蛋白基因 Cry 1 Ab 的烟草叶绿体表达载体 p C TBt , 该载体以烟草叶绿体基因 组 t r nI2t r nA 为同源 重 组 片段 , 含 有壮观霉 素抗 性筛选 标记 基 因 aa A 、质体特 异性 启动子 P rr n 和终止子 T psbA . 利用基因枪转化法 , 将 p CTBt 导入栽培烟草红花大金元叶绿体 , 经过 4 次继代筛选 , 获得 9 个抗壮观霉 素的转化株系 , 转化频率为 013～0 16 株/ 枪 , 其中有 5 个株系 PCR 检测结果为 阳性 , 初步确 定 Cry 1 Ab 基因已 整合到烟草叶绿体中. 转基因烟草抗斜纹夜蛾试验表 明 , 幼虫死亡率 为 10 %～7 5 % , 转基因烟草植株具有较好 的杀虫活性 . 关 　键 　词 : Cry 1 A b 基因; 烟草 ; 叶绿体转化 ; 转基因植株 中图分类号 : Q7 89 ; S572 文献标识码 : A In t egra t ion of Cry 1Ab gene in to chlor opla st gen ome of t obacco an gen er at ion of t ran sf or me plan t s D I NG Yu2mei1 , YAN G Zhen g2an 2 , Zhou Xia o2gan 1 , Z HANG Sha o2son g1 , SUN Ma o2lin 1 3 ( 11 Key L aboratory of A gricult ural Biotech nology of Yu nnan , Kunming 6 5022 3 , Chi na ; 21College of Horticult ur e an L an scap e , Yun nan A gricul tu ral U niver sit y , Ku nmi