单基因人肝癌耐药细胞株(HepG2-MRP1)的构建及其生物学意义.pdfVIP

·548· ·论著· epG2／ 单基因人肝癌耐药细胞株(H MRPl)的构建及其生物学意义 王新平 严律南 潘光栋 夏冬 苟兴华 赵兰英 李德华 韩蕾 【摘要】 目的 对抗肿瘤药的天然耐药和化疗过程中产生的继发性耐药足肝癌化疗敏感性差的 重要原因之一，为探讨体外逆转肝癌多药耐药(multidrugresistance，MDR)的新方法，笔者建立了单 因素人肝癌细胞多药耐药模型HepG2／mrpl，并研究其牛物学特性。方法双酶切克隆质粒pGEM— mrpl获得人全长多药耐药相关蛋白基因(mrpl)，并将其插入哺乳动物表达载体pCI·neo的多克隆位 点，构建重组载体，利用质脂体法将重组载体转入人肝癌细胞H印G2，建立单基因耐药细胞株 HepG2／mrpl。观察细胞的生长规律；MTT法检测其多药耐药性；流式细胞仪检测细胞表面多药耐 resistance-associated mRNA表达 药相关蛋白(multidrug protein，MRP)的表达；RT．