成年大鼠骨髓多能成体祖细胞的克隆化培养及其鉴定.pdfVIP

·474· ·论著· 成年大鼠骨髓多能成体祖细胞的 克隆化培养及其鉴定 冀凯宏 熊俊 向正华 胡凯猛 王英 刘厚奇 【摘要】 目的 优化培养条件，获得体外克隆化培养的成年大鼠骨髓多能成体祖细胞 (rMAPC)，并对其进行表型分析及分化潜能鉴定。方法选择低血清条件培养基全骨髓直接贴壁法 初步分离大鼠骨髓干细胞，用极限稀释法进行克隆化培养；用流式细胞术及免疫细胞化学法对克隆化 4及三个 培养的rMAPC进行表型分析，并进行体外成脂肪、成骨及成神经细胞诱导，RT·PCR检测Oct 胚层早期标志物，确定其表型及分化潜能。结果单个细胞来源rMAPC在体外扩增至20代仍保持良 好的生长状态；流式细胞术及细胞免疫组化检测结果显示CD71、0l—SMA及Vimentin表达阳性；CD34、 CD44、CIM5表达阴性；细胞周期分析显示S+G：+M期细胞约占17％，而处于G。／G。期的细胞占