生物医学研究课题中实验动物的选择和应用.ppt

中国医学科学院医学生物学研究所 * (三)豚鼠： 豚鼠中已确定的免疫球蛋白有：IgG(IgGI、IgG2)、IgA和IgE。IgGI 是变态反应的媒介，IgG2在抗原抗体的反应中起结合补体的作用。 ??? 豚鼠除作为补体的来源外，还被用于结核菌素的皮内试验和接触过敏物质的迟发型变态反应的研究。豚鼠和人的结核菌素反应差别是有无细胞浸润，另外豚鼠的迟发型变态反应在24-48h达到高峰，人在48-96h达到高峰。 中国医学科学院医学生物学研究所 * (四)兔： 新西兰白兔常用于实验室制备抗体，及被用来作过敏反应的研究。由 IgG和IgE引出的过敏反应临床症状相似,机理都是抗原抗体结合和血小板－白细胞凝集形成沉淀物，释放药理活性物质(组织胺和5-羟色胺)进入肺循环，在右心的流出道中产生一种机械和药理的联合作用，导致循环性虚脱。 中国医学科学院医学生物学研究所 * (五)狗： 狗的免疫球蛋白有IgG、IgM、IgA、IgG1、IgG2。 在狗花粉病和各种蠕虫感染中发现IgE。 ??? Lewis等认为狗对颗粒性抗原能较好地产生抗体,但新生狗初次免疫反应所产生的抗体几乎是IgM类,成年狗产生的抗体几乎是IgM和IgG,这两种球蛋白的数量与初生狗的IgM几乎相等。新生狗在再次反应中能合成IgG和IgM。 ??? 除人之外，狗是研究人的变态反应和气喘的适宜的实验模型。狗由豚草花粉(Raweed pillens)致敏后，血液和皮肤中出现IgE抗体。 中国医学科学院医学生物学研究所 * 二、肿瘤学研究中实验动物的选择 (一)昆明小鼠? 肉瘤180（S180)、肉瘤37(S37)、艾氏癌腹水型(EAC)、艾氏癌实体型(EC)、肝癌实体型(Heps)、Harding-Passey黑色素瘤等，可接种昆明小鼠制备实验肿瘤模型。 (二)615小鼠:?用于小鼠网织细胞白血病L615的实验模型。 (三)DBA/2小鼠: 用于小鼠淋巴细胞白血病L1210的实验模型。 (四)C57BL/6小鼠: 用于Lewis肺癌，黑色素瘤B16，小鼠乳腺癌 M5076的实验模型。 (五)Wistar大鼠: 用于瓦克癌肉瘤W256，软骨肉瘤，吉田肉瘤 腹水型的实验模型。 中国医学科学院医学生物学研究所 * 三、药理学研究中实验动物的选择  药理学研究中一般选用小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等。 ??? (一)急性毒性试验? 常用小鼠，体重18～22g，雌雄均可。每次5～10只，尾静脉注射或腹腔注射一定剂量药液，观察有无不良反应(如惊厥、四肢瘫痪、步伐不稳、竖毛、呼吸抑制等)或死亡现象。一般观察24～48小时。 中国医学科学院医学生物学研究所 * (二)亚急性和慢性毒性试验 ??? 可选小鼠，方法和急性毒性试验基本相似，但剂量小，小鼠按体重计算每天用人用剂量的20～50倍口服或腹腔注射，连续观察1～8周。慢性毒性试验则需3～6个月。观察体重、进食量、进水量的变化，以及有无其它不良反应或死亡( 包括内脏肉眼观察或组织切片检查)。必要时作血象、肝肾功能化验检查。该项实验也常用大鼠。 中国医学科学院医学生物学研究所 * (三)半数致死量的测定? 简称LD50.表示药物的毒性时比较灵敏准确。一般 以每Kg多少mg表示(药物剂量/体重)。临床应用时一 般取1/5～1/10 LD50开始试用，观察毒性和疗效。 由小剂量，到大剂量逐步试用至不能耐受为止。 测定LD50时常选用小鼠，体重18～22g,雌雄均可, 每次实验需30-60只，一般分5～6组，每组6～10只。 给药途径与临床应用相同，有口服、腹腔注射、静脉 注射。给药容量以每鼠0.5ml左右为宜。根据药物出 现作用的快慢，一般观察1～4d或24～72小时。 以 死亡为主要指标。 中国医学科学院医学生物学研究所 * (四)过敏试验 取豚鼠6只，体重250～350g，隔日腹腔注射药液0.5ml，共注射 3次。然后分成2组，分别在第一次注射药物的第14天及21天再从颈静脉注射原药液1ml。如有过敏反应,则在注射药物后几分钟内，豚鼠表现兴奋不安，呼吸困难，迅速窒息死亡。 中国医学科学院医学生物学研究所 * (五)热原检查 热原是由细菌产生的一种毒素。注射剂中若含有热原，会使人发烧。 ??? 检查热原使用的动物是家兔，一般选用3只，体重1.5kg以上，注射药物前测量肛门体温3次,取平均值(家兔的正常体温38.5～39.6℃)。然后耳静脉注射药液(1～2ml/Kg),注射药物后1小时、2小时、3小时各测