天然药物化学（黄酮类化合物）.pptVIP

锆盐: 2%二氯氧化锆甲醇液 镁盐 醋酸镁甲醇液作显色剂，可在纸上进行。 二氢黄酮（醇）类显天蓝色荧光，若具有C5-OH，色泽更明显。 而黄酮、黄酮醇及异黄酮类则显黄-橙黄-褐色。 氯化锶(SrCl2) 使具有邻二酚羟基的黄酮类化合物显绿-棕色-黑色沉淀。 氯化铁(FeCl3) 检查酚羟基。 多数黄酮类化合物具有酚羟基，可产生阳性反应，生成绿、蓝、黑、紫等颜色。 条件： 1、具有下列结构（5-羟基黄酮，2’-羟基查耳酮） 2、有无机酸或有机酸存在 在草酸存在下，显黄色并带绿色荧光。 在枸橼酸丙酮存在条件下，只显黄色而无荧光。 （三）硼酸显色反应 日光及紫外光下，通过纸斑反应，观察样品用碱性试剂处理后的色变情况。 1. 二氢黄酮类易在碱液中开环，转变成相应异构体——查耳酮类化合物，显橙-红色。 （四）碱性试剂显色反应 2. 黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变 为棕色，据此可与黄酮类区别。 3. 黄酮类化合物当分子中有邻二酚羟基取代或 3,4’-二羟基取代时，在碱液中不安定，很快 氧化，由黄色?深红色?绿棕色沉淀。 (五)与五氯化锑的反应查耳酮的无水CCl4溶液与五氯化锑作用生成红或紫红沉淀 黄酮、黄酮醇、二氢黄酮类显黄-橙黄色。 方法：样品5-10mg溶于5ml无水CCl4中，加1ml 2%的五氯化锑的CCl4溶液。 反应必须无水，否则生成沉淀不稳定。 （六）Gibbs反应 检查5-OH对位未被取代的黄酮。 将样品溶于吡啶中，加入Gibbs试剂显蓝或蓝绿色。 Gibbs试剂: 甲液：0.5%2,6-二氯苯醌-4氯亚胺的乙醇溶液。 乙液：硼酸-氯化钾-氢氧化钾缓冲液(pH9.4) 一、提取 黄酮类化合物在花、叶、果等组织中，多以氧苷的形式存在。 在木部坚硬组织中，多以游离苷元形式存在。 根据黄酮存在形式不同，极性不同，溶解性不同，采用不同溶剂提取。 第三节??? 黄酮类化合物的提取分离 苷元 多用CHCl3、Et2O、EtOAc等极性较小溶剂提取；对于多OCH3化的成分，用苯、石油醚提取； 对于极性大的成分，如查耳酮、橙酮、双黄酮、羟基黄酮等，用EtOAc、EtOH、Me2CO、MeOH;H2O(1;1)等溶剂提取。 苷类 水或热水提取，（多糖苷在热水中溶解度较大，在冷水中溶解度较小）；也可用EtOH、MeOH、EtOAc提取。 含羟基的苷或苷元，可用碱水提取。 提取花青素类可加入少量酸，但一般黄酮类化合物则应避免。 碱水提酸沉淀法 适用于含酚羟基的化合物，如槐米中芦丁的提取。 注意事项： ①酸碱度不宜过大 ②邻二酚羟基的保护：碱性条件下，邻二酚羟基 易被氧化，加硼砂保护 ③石灰乳的加入可除去果胶、粘液等水溶性酸性 杂质 二、粗提物的精制处理 溶剂萃取法去杂 石油醚：除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素 水溶醇沉：除去蛋白质、多糖、大分子水溶性杂质 逆流分配：水-乙酸乙酯，正丁醇-石油醚 在萃取除杂的同时，可使不同极性或极性相差较大者分离，如极性不同的苷和苷元，极性苷元和非极性苷元。 炭粉吸附法 适用于苷类的精制工作。 植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，过滤得吸附苷的活性炭粉末。 依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇洗脱，分步收集、检查、合并。 大部分苷类可用7%酚/水洗下，经减压浓缩至小体积，乙醚除酚，余下水层经减压浓缩得较纯黄酮苷。 离子交换法 用阳离子交换树脂从水提液中吸附黄酮类化合物，与不被吸附的杂质分离，再用甲醇将黄酮类化合物洗脱。 RSO3-H + ArOH（黄酮）? 无法交换，故实际上树脂仅起到吸附作用。 三、分离 1. 极性大小不同，利用吸附或分配原理进行分离常用吸附剂有聚酰胺、硅胶、纤维素粉。 １）聚酰胺层析：主要有聚己内酰胺型(Perlon)、六次甲基二胺己二酸盐(Nylon)型、聚乙烯吡咯烷酮(Polyclar)型三种。 各种溶剂在聚酰胺柱上洗脱能力由弱至强依次为： 水，甲醇，丙酮，氢氧化钠水溶液，甲酰胺，二甲基甲酰胺，脲素水溶液。 其原理是酰胺羰基与黄酮酚羟基形成氢键缔合而吸附，吸附能力与酚羟基多少、位置及氢键缔合力大小有关。 黄酮类化合物从聚酰胺柱洗脱时有下列规律： 苷元相同，洗脱先后顺序一般为： 三糖苷?双糖苷?单糖苷?苷元 母核上增加羟基，洗脱速度相应减慢 羟基位置的影响：（洗脱先后顺序）具有邻位羟 基黄酮?具有对位（或间位）羟基黄酮 不同类型的黄酮类化合物，先后流出顺序一般是：