鸡骨保护素(OPG)在毕赤酵母中的分泌表达及生物学活性测定.pdfVIP

鸡骨保护素（OPG ）在毕赤酵母中的分泌表达及生物 学活性测定 姚静，胡云峰，王艳，张风荣，侯加法* 南京农业大学动物医学院，南京 （210095 ） E-mail ：yaojingnnxh@163.com 摘 要：为了在毕赤酵母中分泌表达鸡骨保护素（osteoprotegerin ，OPG ），采用DNA重组技 术将chOPG成熟肽cDNA片段插入毕赤酵母表达载体pPICZα-A 中，以电穿孔法转化酵母 X-33 ，用Zeocin 平板筛选重组子，经甲醇诱导表达后， SDS和免疫印迹分析表达产 物，由于糖基化不同，表达产物有两种，其相对分子量分别为43kDa和53kDa ，表达量约为 200mg/L ，经Western 印迹验证，有较好的抗原性。表达产物经处理后加入到体外培养的鸡胚 破骨细胞上，能显著抑制成熟破骨细胞的骨吸收活性，使骨吸收陷窝个数和面积均减少。 关键词：鸡骨保护素；毕赤酵母；分泌表达；破骨细胞