LBH589或联合硼替佐米逆转髓系白血病耐药及其分子机制研究.pdfVIP

·537· ·论著· LBH589或联合硼替佐米逆转 髓系白血病耐药及其分子机制研究 江雪杰 孟凡义 周红升 王蔷 吴福群黄凯凯黄明 王治香 陈伟伟 【摘要】 目的探讨新一代组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589联合蛋白酶体抑制剂硼替佐米逆 转急性髓系白血病(AML)细胞耐药效应及其分子机制。方法耐药AML细胞株HL-60／ADM和难治 性AML原代细胞与不同浓度LBH589、硼替佐米或两者联合进行体外培养，采用MTT法检测细胞增殖 活力，Hoechst33342染色和AnnexinV—FITC／PI双染流式细胞术检测细胞凋亡，用阿霉素摄取率并结 合细胞增殖抑制率评估逆转耐药效应。进一步检测处理前后细胞MRPl及信号通路蛋白变化。结果 nmoL／L LBH589、硼替佐米均能够抑制HLJ50／ADM和难治性AML原代细胞增殖，诱导凋亡，其中2l LBH589和12 nmoL／L硼替佐米联合时作用最强，经calcusyn软件分析证明两者联合具有明显的协同 作用(c，值分别为O．531和0．498)。联合组MRPl阳性率为(57．78±3．34)％，显著低于LBH589、硼 替佐米单药组[(76．06±5．17)％和(71．83±4．53)％，P值均O．05]，而单药组与对照组之间差异也 有统计学意义(P值均O．01)。联合组细胞内阿霉素摄取率为(64．8l±3．69)％，明显高于单药组 [(28．96±2．52)％和(37．29±3．71)％](P值均0．05)。LBH589联合硼替佐米可以明显抑制磷酸 化Akt和磷酸化IKKa／B蛋白的表达，降低P13K／Ak∥NF—KB通路的活性．明显上调P153蛋白的表达， 抑制NF-KBP65、Bcl-2、XIAP和MRPl蛋白活性，促进C船p聃e-8、C鹊pase．3和PARP的裂解激活。结论 LBH589、硼替佐米能够抑制耐药AML细胞增殖和促进凋亡，并逆转耐药，两者联合具有明显的协同 作用。P13K／Ak∥NF-KB信号传导通路受抑或阻断可能是其主要的作用机制。 【关键词】 LBH589；硼替佐米；白血病； 耐药 Rever髓le仃bctofLBH589aloneorinc哪binationwi啦bonezomjbon in Ieu- dnlg-他sistanoemyeloid keIIIiaanditsm茂haIIism 肌们X淝啦，肘E／vG几n川．删D￡，舶增咕k凡g，黝ⅣGQ谊昭，删几· gnn，日蝴ⅣG勋i-地i，Ⅳ肌M胧昭，黝，vG肌i哨缸，lg，c舾Ⅳ％i-柳i．脚口，t胱m矿胁舢蝴，Ⅳ口肛 傩i舭 危硝日缸础nZ。So眦km胁d幻“№妇惜饥G眦噼胁H，5，∞，5 corre印，ldi昭。眦br：M喇C几n-一，凸m甜：胱，咖@脚dmn以com．cn inhibitor reversale仃ectofhistone LBH589aloneor 【Abstmct】obj∞6ⅦTbinvestigate deacetyl聃e incombinationwith inhibitorbortezomibon resist粕ceinacute proteasome dmg myeloidleukemia(AML)and AML itsmechanism．MethodsExvivoculturesofHL-60／ADMcellsandfhshrefhctorycell8w