DVL-1和DVL-3基因在先天性巨结肠症肠管中的表达.pdfVIP

生 尘 鲞查 ! 171第35卷第1期 ChinJPediatrSurg，January2(}14，Vo1．35，No．1 51 · 临 床 研 究 · DVL一1和 DVL一3基因在先天性巨结肠症 肠管中的表达 陈东 弭杰 伍美 高红 【摘要】 目的 通过dishevelled-／(DVL-1)和dishevelled-3(DVL-3)基因及其相关蛋白在先天 性巨结肠症 (Hirschsprungsdisease，HD)中表达水平的研究，探索DVD1和DVL-3与 HD的发病关 系。方法 利用荧光实时定量PeR(quantitativereal-timepolymerasechainreaction，qRT-PCR)、蛋白 质印迹 (Westernblot)和免疫组织化学方法检测5)(例 HD患儿狭窄段 (无神经节细胞)和正常段 (有 神经节细胞)肠管组织 DVL-1和DVL-3的表达情况，并对其表达进行定量分析与比较。结果 DV 1在 HD狭窄段肠管中mRNA表达量是正常段肠管中的2．O6倍；DVL-3在 HD狭窄段肠管中 mRNA表达量是正常段肠管中的3．12倍 ，差异有统计学意义 (P(0．03)。Westernblot结果显示， DVL-1在 HD狭窄段肠管中蛋白相对表达量为39．71±4．53，高于正常段肠管蛋白表达量为15．O1± 2．66，差异有统计学意义 (P0．05)；DVL-3在 HD狭窄段肠管中蛋白相对表达量为53．90土6．79，高 于正常段肠管蛋白的表达量2()．13±3．63，差异有统计学意义(P0．05)。免疫组化结果显示，DVL-1 和DVL-3在 HD狭窄段肠管的黏膜层细胞胞质内呈强阳性反应，呈深棕黄色，而在 HD正常段肠壁 的黏膜层细胞胞质内呈阴性或弱阳性反应，无色或淡黄色；此外，研究还发现，与正常段的神经丛相 比，狭窄段肠管中异常增生的神经纤维组织内DVL-3的表达信号更强。结论 DVL-1和 DVL-3 mRNA与蛋白在HD狭窄段肠管中高表达 ，提示DVL-1和DVL-3与HD的发生有密切关系，可能在 先天性消化道畸形的肠道发育中具有重要作用；DVD3可能成为今后临床诊断HD一项参考指标。 【关键词】 先天性巨结肠；蓬乱蛋白；聚合酶链反应 TheExpressionofdishevelled-1and dishevelled-3 genesin colonsofHirschsprungsdisease CHEN Dong，MIJie， UMei，GA0Hong．KeyLaboratoryofPediatricCongenitalMalformations， MinistryofPublicHealth，ShengJingHospitalofChinaMedicalUniversity，Shenyang110004， China Correspondingauthor：GAOHong，E-mail：gaohong515@ ina．corn [Abstract] Objective Toevaluatetheexpressionofdishevelled一1(DVL，1)anddishevelled一3 (DVLr3) genesand proteinsin the aganglionicand normalsegmentofcolon in patientswith Hirschsprungsdisease(HSCR)．Methods TheexpressionofDVD 1andDVL-3genesweredetected by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR )， W estern blot and immunohistochemicalstaining in theaganglionicandnormalsegmentofcolon in50 patientswith HSCR．Results ThemRNA expressionofDVL一1andDVL-3was2．06fotdand3．12f0ld inthe aganglionicsegmentcolon tissuescomparedto thenorma1segment，respectively．Similarly，the