淋巴组织细针吸取细胞HE染片褪色后作免疫组化的体会.pdfVIP

· 178· 西南国防医药2010年2月第2O卷第2期 淋巴组织细针吸取细胞 HE染片褪色后作免疫组化的体会 戴 芳，杨举伦，王 丽，王 力，杨丽琳 ，蔡 琳 ，宋蜀伶 [摘要] 目的 探讨淋巴组织细针吸取细胞 (FNAC)HE染片褪色后作免疫组化的效果。方法 l0例淋巴组 织细针吸取细胞学HE染片，采用高锰酸钾 一草酸褪色后应用免疫组织化学S—P法，对 1O例淋巴组织针吸细胞涂 片进行标记，光学显微镜下观察染色效果。结果 10例淋巴组织针吸细胞涂片经HE染色细胞学诊断：4例无恶性 细胞，4例核异质细胞，2例可疑恶性细胞；活检石蜡切片诊断证实良性病变6例，恶性病变4例，良性符合率67％， 恶性符合率50％。HE染片褪色行免疫组化标记后诊断：2例转移性癌，2例可疑恶性淋巴瘤，6例无恶性细胞，良 性符合率 100％，恶性符合率 100％。10例淋巴组织针吸细胞涂片经 HE染色细胞学诊断4例有分歧，经免疫组化 标记后均能明确诊断。结论 FNAC检查对初筛淋巴结疾患的良恶性判断及肿瘤分型有重要意义；淋巴组织细针 吸取细胞 HE染片褪色后行免疫组化染色，方法简便易行 ，在病理诊断中有一定的应用价值，为细胞学诊断和鉴别 诊断提供了一个新的手段 ，从而进一步提高细胞学诊断水平。 [关键词] 淋巴组织；细针吸取细胞 ；涂片；HE褪色；免疫组化 中图分类号 R446．6 文献标识码 A 文章编号 1004—0188(2010)O2—0178．03 doi：10．3969／j．issn．1004—0188．2010．02．028 在临床细胞病理诊断中，常遇到难以诊断或难以 结假想半径 1／3～2／3为宜。进针后，形成负压，并 分型的特殊细胞或细胞组合，需要做免疫组化染色进 向不同方向反复提插吸取几次后，用无菌棉球压迫 一 步确定。但有时无备用 白片或难以重新获得标本 进针部位出针，立即作厚薄均匀的涂片，浸入95％ 制片，或重新制成的涂片又没有原涂片中的特殊细胞 乙醇中固定，HE染色。 或细胞组合。因此，在原涂片上进行免疫染色成为关 1．2．2 HE染色玻片脱胶处理 将玻片放人 I、Ⅱ 键。细针吸取细胞 (FNAC)技术是临床检查淋巴组织 号缸二甲苯 (两缸浓度相同，主要 目的是为脱胶彻 疾病的常用微创技术。淋巴造血组织疾病诊断是病 底)内各 30min；先后置人无水酒精、95％酒精、 理诊断中的难点，因细胞丰富且难鉴别，需结合免疫 70％酒精各 5min，蒸馏水洗3min。 组化或分子生物学技术才能确诊和分型。同时，淋巴 1．2．3 褪色 将水化的玻片浸入0．25％高锰酸钾 组织细针吸取细胞涂片诊断因缺乏足够的组织结构 中5min，蒸馏水洗 3min；再置人 0．5％草酸漂 白 而进一步增加 了诊断的困难 。笔者探讨 了淋巴组 2min，蒸馏水洗3min。 织细针吸取细胞涂片苏木精 一伊红(HE)染片褪色 1．2．4 免疫组化操作 褪色后的玻片放入 PBS液 后，行免疫组化染色辅助诊断的效果。 漂洗 3次。不进行抗原修复，未加阻断剂。加一抗 (CK和LCA、LCA和 CD20)各50 l，置湿盒内4℃ 1 材料与方法 孵育过夜。PBS液漂洗3次，滴加 Envision二抗50 1．1 标本和试剂 选用我科细针抽吸淋 巴组织细 l，置湿盒内37cC孵育30min。PBS液漂洗 3次， 胞标本 (HE染色)10例 (既有淋巴组织针吸细胞涂 滴加DAB显色剂 50 1，显微镜下控制显色程度，待 片 HE染片细胞学诊断结果 ，又有活检石蜡切片经 阳性染色明显，背景未着色前，放人蒸馏水中终止显 HE染色和免疫组化染