鸡组织中氯霉素残留IAC-GC-μECD检测方法研究.pdfVIP

摘 要 氯霉素作为厂‘谱抑菌性抗生素在兽医领域内被广泛使用，但是20世纪90年代之后由于在动 物性食品中残留的潜在危害披欧盟、美国、加拿大和中国等国家逐渐禁止使用。本实验研究建立 了鸡肌肉和鸡肝脏组织中氯霉素残留的免疫亲和色谱一气相色谱一微池电子捕获检测器 (IAC—GC一旭cD)的检测方法。为组织中氯霉素的残留监控提供了快速而有效的检测方法。 本实验成功的制备了免疫亲和色谱柱，并且对免疫亲和色谱柱的特性进行鉴定。采用辛酸一 饱和硫酸铵法纯化针对氯霉素的腹水，透析之后用紫外分光光度计测定单克隆抗体的浓度为 5．1mg／ml。取经溴化氰活化的Sepharose4B与单克隆抗体抗体偶联，偶联比为85．21％，封闭活化 CAP的PBS(含0．15MNaCl)连续加入到IAC柱 位点．洗涤，制备I^C柱。将20M舍有500ng／ml 的添加回收率为99．蹁。两个月内对三根免疫亲和色谱柱的柱容量变化进行监控。发现使用5次 后柱容量稍有降低。表明一小部分抵抗力差的抗体在甲醇的反复作用之后失去了与氯霉素的结台 能力。重复使用15次之后，柱容量变为原来的58％(1890ng／m1)，仍然满足实验条件的需要。 本文成功的建立了鸡肌肉和鸡肝脏组织中氯霉素残留的免疫亲和色谱一气相色谱一微池电子 捕获检测器(IAC—Gc一峨D)的检测方法。用乙酸乙酯来提取样品，正己烷脱脂，免疫亲和柱净化， 氮气吹干后，用Sylon 添加水平，平均回收率范围在74，3％～96．1％之间，日内变异系数范围在2．8％～3．9％(n=4)之问， 本文还建立了液液分配一气相色谱一微池电子捕获检测器的检测方法。用乙酸乙酯来提取样 品，正己烷脱脂，乙酸乙酯液液分配．氮气吹干后，用SylonBFT衍生化。进Gc分析。鸡肌肉 异系数范围在7．9％～14．5％(n=3)之间，检测限为0．1pg／kg，定量限为0．2pg／kg。 本实验还对IAC净化方法和液一液分配净化的方法进行了比较，IAC净化方法比液一液分配净 化方法气相色谱峰中杂质峰更少，检测限更低，说明IAc净化方法具有较强的特异性和选择性。 所以本实验建立的IAC净化方法优于液一液分配的净化方法。 关键词： 氯霉素(CAP)，免疫亲和色谱(IAC)，气相色谱(Gc)，残留 Abstract aneffectiveantibioticthathas beenusedtotreat Chloramphenicol(CAP)is widely food-producing animals．In useofCAP the w∞banned andSOondue 1990s，the by European Union叫)、USA、China tothe healthrisk itstracesinfood．TheIAC-GC-蝇CDof posed method potential by Chloramphenicol residue established determinationis inchickenmusclesandliversinthis successfolly Study． Inthis columnis and forits study,theimmunoaffinity preparedsuccessfullyappraisedproperty． The