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- 2017-08-27 发布于云南
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血液病检验技术实验指导
实验一、活化凝血时间测定
【实验原理】 同试管法CT测定。试验中加入白陶土-脑磷脂的悬液以充分激活因子Ⅻ和Ⅺ,并为凝血反应提供丰富的催化表面,故称为活化凝血时间(ACT);还可以避免因接触激活阶段的不同结果带来的影响,从而提高了本试验的敏感性和重复性。
【试剂】
1.脑磷脂的制备 脑磷脂是将兔脑粉中的组织凝血活酶除去参与外源凝血途径的蛋白部分后所得的磷脂,故又称部分凝血活酶。取干燥兔脑粉1.2g加25ml丙酮,放置2h后过滤,将此兔脑粉加氯仿25ml,连续震荡2h,以滤纸过滤,滤液蒸发后为淡黄色蜡状物,刮入玻璃研钵中,加12ml生理盐水研磨成均匀乳剂,以每安瓶0.25ml分装。
2.4%白掏土悬液 白陶土2g加入50ml生理盐水中,室温保存,用前摇动。
3.4%白陶土-脑磷脂悬液 将脑磷脂用巴比妥缓冲液作1:50稀释后,再加等量4%白陶土悬液混合而成。4οC可保存3天,用时充分混合。
4.巴比妥缓冲液 巴比妥钠11.75g、NaCl14.67g、0.1mol/Ll430ml,加蒸馏水至2000ml。此缓冲液pH应为7.3,否则影响试验稳定性。
【操作方法】
1.在含4%白陶土-脑磷脂悬液0.2ml的试管中注入受检全血0.5,轻轻混匀。
2.其余操作同试管法CT测定。
【参考值】 1.70±0.76 (1.
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