毛细管电泳-安培检测法测定夏枯草中香豆素、芦丁与咖啡酸.pdfVIP

毛细管电泳－安培检测法测定夏枯草中1 的香豆素、芦丁与咖啡酸 石焱芳、陈国南 * 教育部食品安全分析与检测技术重点实验室（福州大学）， 福州大学化学系，福州，福建， 350002 E-mail: gnchen@ 摘要：本章采用毛细管电泳安培检测法（ CE-AD ），对香豆素、芦丁与咖啡酸 三种中草药的有效成分进行分离分析。在自组装仪器上，以 0.5mm 碳圆盘微 电极为工作电极，研究了电极电位，运行缓冲液浓度及酸度，分离电压和进 样时间等因素对待测物的分离检测的影响，得到了最优化的分离条件。在 0.90V 的检测电位下，以 50mmol/L 的硼酸－硼砂缓冲液（pH ＝8.95 ）为运行 液，当毛细管长度为 60cm ，分离电压为 12kV 的时候，三组分在 18min 内达 到基线分离。据此建立了香豆素、芦丁与咖啡酸三种化合物的毛细管电泳安 培检测方法，并将该方法成功应用于夏枯草中三种物质含量的测定。 关键词：毛细管电泳安培检测法，香豆素，芦丁，咖啡酸 1 引言 夏 枯 草 （ 学 名 为 Prunella vulgaris Linn ， 英 文 名 为 Common Selfheal ），为唇形科夏枯草属植物夏枯草的干燥果穗，因“此草夏 至后即枯”得名 [ 1 ] ，是传统中药之一，一般取其干燥果实入药。夏枯 草属植物全球有 15种，广泛分布于欧亚的温带地区、非洲西北部及北 美洲，中国产4 种及 3个变种。其味苦、性寒、辛，有清热明目、泻肝 火、清热散结等功效。其可用于治疗头痛眩晕，口眼歪斜，筋骨疼痛， 目赤肿痛，畏光流泪，乳腺炎，乳癌，高血压（有降压、利尿作用）， 淋巴结核，浸润性肺结核，单纯性甲状 腺肿，腮腺炎，急性黄疸型传 染性肝炎，血崩，带下，猪、牛、羊传染性结膜炎、角膜炎等，对痢 1本文得到教育部博士点基金（项目编号：20040386002 ）资助 1 疾杆菌也有抑制作用 [ 1 -8 ] 。由于其重要的药用价值和广泛的药理作用， 夏枯草越来越引起人们的关注。多年来，国内外学者对夏枯草进行了 广泛的研究，尤其是化学成分和药理作 用面作了较为深入的探讨。夏 枯草化学成分复杂，含糖类主要为游离 的单糖、双糖及多糖；香豆素 [ 9 ] ，黄酮类主要是芦丁、芸香苷、金丝桃苷等成分[10 ] ；有机酸类如含 有顺式和反式咖啡酸、乌苏酸 [ 1 1 ] ；三萜类如常见的熊果酸、齐墩果 酸等 [10 ] 及挥发油类等等。目前测定以上几类成分的分析方法主要为 紫外分光光度法 [ 12 -1 4 ] ，薄层扫描法和高效液相色谱法[ 15 -2 0 ] ，这些测 定方法为有效的开发利用夏枯草属药用植物资源，评估其药用价值提 供了依据。但是，这些分析方法或是由 于步骤复杂、繁琐或是由于检 测灵敏度低等缺点而受到限制。 毛细管电泳 (CE) 作为一种分离方法以其高效、快速、进样量少等 优点得到了日益广泛的重视和应用。邱涵等人采用高效毛细管电泳－ 紫外法，以25mmol/L 硼砂－硼酸为缓冲液，以胶束毛细管色谱(MECC) 模式成功地分离克炎肿片中的维脑路通和香豆素 [ 2 1 ] 。陈刚等人采用 毛细管电泳电化学检测法测定了葛根和 葛藤中葛根素、大豆甙元和芦 丁含量，三组分在 12min 内完全分离[ 2 2 ] 。吕元琦建立了毛细管电泳－ 紫外法中药复方制剂双黄连口服液中黄芩甙元、黄芩甙、绿原酸和咖 啡酸的方法，在优化的条件下，20min 内实现了4 种物质的良好分离 [ 2 3 ] 。我们采用高效毛细管电泳- 电化学检测法, 以碳圆盘电极为工作电 极，通过优化实验参数，对同时测定夏枯草中的香豆素、芦丁和咖啡 酸的方法进行了研究，结果表明该方法简便 、可靠、灵敏，样品用量 少，可用于直接检测，适合于常规分析。 2 实验部分 2.1 仪器 自组装的毛细管电泳－安培检测装置见图 1 。组件包括无极可调 高