甜蛋白Monellin在毕赤酵母中的分泌表达-高技 术通 讯2.pdfVIP

维普资讯 高技术通讯 2003．11 甜蛋 白Monellin在毕赤酵母 中的分泌表达① 吴 刚② 汪亚平 朱作言③ (中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室 武汉430072) 摘 要 在西非热带植物Dioscoreophyllum cumminsii中存在着一种 由两条多肽构成的 甜度极高的蛋 白Monellin。本研究根据 已知 的Monellin晶体衍射分析结果和毕赤酵母 (Pichiapastoris)基 因偏爱密码子设计并合成了连接两条多肽的重组基因，插入到毕赤酵 母分泌表达质粒pGAW_~ 中。扩增后 ，电击穿孔转化毕赤酵母 GSll5，筛选高产菌株放 大培养。以5升罐发酵培养，表达量为 150mg／L。经纯化，可以获得大于 130mg／L的具 有高甜度的活性蛋 白。 关键词 甜蛋 白，Monellin，酵母 ，表达