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第四章 食品传播的病毒 对食品中病毒的了解相对较少,为什么? 病毒不同于细菌,没有完整的细胞结构,不能自身复制繁殖,只能寄生在活细胞内,是专性寄生微生物 病毒不像细菌可在培养基上生长并形成菌落,便于观察,所以分离、培养病毒首先要培养细胞(或组织) 病毒颗粒小,普通显微镜无法观察,也容易忽略 病毒在食品中的数量少,必须用提取和浓缩的方法,其回收率约为50% 病毒污染食品的途径 动植物生长的环境被病毒污染 原料携带病毒 食品加工人员带有病毒 不良的卫生习惯 交叉感染 病毒性肠胃炎 病毒性肠胃炎: 以食物为载体,经粪-口途径传播 病毒性肠胃炎居于食源性病毒感染的第二位,仅次于普通感冒 第一节 轮状病毒(Rotavirus) 轮状病毒最早是在1973年,由澳大利亚的女学者Ruth Bishop在做电子显微镜研究时发现的 为一无外膜的double strain RNA病毒 这个病毒的形状很象一个轮子,所以它的名字就被称为Rotavirus 之后就被证实这个就是造成婴儿腹泻(病毒性腹泻)的最主要原因 Rotavirus Rotavirus Gastroenteritis125 million cases, 900000 deaths globally per year Asian Rotavirus Surveillance Network (ARSN) Rotavirus Hospitalizations in children 0-5 years 根据轮状病毒抗原性及遗传性的不同将其分为A~G 7个血清型,其中A、B、C 3型是人类腹泻的重要病原,D~G型只引起动物腹泻。血清型之间无交叉反应 抵抗力:在粪便中存活数天到数周,耐乙醚、酸、碱和反复冻融,不耐热,55℃加热30min可被灭活 二、流行病学 轮状病毒感染广泛分布于世界各地,具有发病急、传播快、发病高的特点 对象以6个月至2岁婴儿为多,潜伏期一般为2d 在季节变化不明显的温带和亚热带地区四季均可发病,季节性较明显的地区以秋冬季为多发病 有再次感染发病现象,不同血清型的病毒无交叉免疫性 五、诊断 取患者粪便标本用电镜、免疫电镜或酶联免疫吸附法检出病毒或其抗原 提取病毒RNA进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,可出现11条区带,组成轮状病毒特定的电泳谱,在临床诊断和流行病学调查中有重要意义 乳胶凝集试验检出病毒或其抗原,也是特异性强,敏感,稳定的方法 二、流行病学 传染源 诺沃克病毒感染的患者、隐性感染者及健康携带者均可为传染源 传播途径(主要是通过水和食物传播) 食物或饮品; 手 直接接触(如看护照料病人、共同进餐、共用餐具等) 粪口途径 暴发期间,空气传播和污染物传播也可促进蔓延。 暴发期间最初病例经常由于接触被污染的媒介物(食物或水)引起,而第二、第三代病例则由人对人传染引起。 三、发病机理 诺沃克病毒侵染人体组织(肠道、气管)黏膜上皮并复制而引起绒毛轻度萎缩。 四、临床表现 起病突然,主要症状为发热、恶心、呕吐、腹部痉挛性疼痛及腹泻,可伴随头痛、肌痛、咽痛等症状。 在儿童中呕吐更为多见。而成人多见腹泻,大便为稀水便或水样便,无粘液脓血,无白细胞,2h内4次~8次,持续12h~60h,一般48h,二度感染的机会很高。 (1)免疫电镜法(IEM) 电镜一直是病毒检测的主要手段,具有直接、可靠的优点,需要的样品量为106~107个病毒颗粒/mL排泄物,在发病早期适用。 免疫电镜在显微镜下包被康复病人血清,血清抗体与同源病毒相结合,使灵敏度提高10-100倍,但不适合大规模流行病学调查 (2)ELISA法 该法特异性强、灵敏度高、简便经济,检测样品量要求104~106病毒颗粒/mL排泄物,是目前可广泛应用的检测方法 (3) RT-PCR和核酸杂交法 该法是检测病人排泄物和环境样品中诺沃克病毒基因的特异手段,方法灵敏度为102~104病毒颗粒/mL排泄物,方法依赖于特异性的引物或探针 六、预防 由于尚无疫苗预防,采取措施减低染病机会: 进食煮熟食物,尤其是贝壳类海产品 处理食物或进食前、如厕后,以及处理呕吐物或粪便后须彻底洗净双手 用漂白粉复盖呕吐物和粪便 保持室内空气流通 案例 20世纪70年代,澳大利亚爆发2000多人感染诺沃克病毒。原因是运垃圾船将垃圾倒在捕捞贝类的区域。 2006年11月,美国 “海洋自由”号豪华邮轮在为期一周的航行中,300多名乘客和船员感染了诺瓦克病毒,超过该船搭载总人数的7% 2002年以来,日本每年都会爆发诺瓦克病毒,其中一些和食用牡蛎(生蚝)、生海鲜有关 2006年底的一周内,日本各地小儿科医疗机构上报的诺瓦克病毒腹泻人数达到6万多人,发病率超过
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