实验四___植物组织中可溶性糖含量的测定.pptVIP

实验四　植物组织中可溶性糖含量的测定 一、实验目的：掌握蒽酮比色法测定可溶性糖含量的提取和方法原理；掌握分光光度计中标准曲线制作的使用程序。二、实验原理：（P48）三、实验材料：绿豆黄化苗四、实验步骤：1.可溶性糖的提取：材料不需烘干（1 g鲜重）加入10 mL 纯水，80℃水浴30min，过滤后定容至50mL 。(不必脱色和离心） 2.绘制标准曲线 ： 将标准葡萄糖液稀释成0、20、40、60、80、100μg/mL的不同标准溶液。各取1mL，加入　5mL蒽酮试剂，混匀，沸水浴10min,冷却后在625nm下比色，绘制标准曲线。 3.样品液显色和比色（不用稀释样品） 723G型分光光度计“标准曲线”建立方法 按“SET”进行设置，按“↓翻页”可在标样间切换，设置完毕后。按“100T％”调零，出现： 按“1”进入样品“测量”功能。（此功能是对样品的测量，需要有参比杯做对照。）按“ENT”，出现： * * 问答题： 1、提取可溶性糖可用什么溶剂。什么情况下用酒精？测定可溶性糖含量还有什么方法？蒽酮比色法测定的糖包括哪些类型？ 2．配制蒽酮试剂要注意什么细节？ 3．如何计算植物材料的可溶性糖含量？请列出公式。 4. 请问比色时空白调零用何种溶液？ 温馨提示：723G型分光光度计的“浓度测量”下的“AC建曲线”程序可自动进行标准曲线的建立，并建立好该标准曲线的曲线方程式，求出线性相关的系数。当测量样品的浓度时，使用“浓度测量”下的“测量”程序可根据方程式直接得出该样品的浓度。不需要您们另外用excel软件或画坐标图查出。 在主界面下，按“2”进入“浓度测量”功能，出现如下界面： 4 参数设置 1-4选择 PRN打印 3 置入曲线 2 AC建曲线 1 测量 浓度测量 进行此功能操作流程如下： 按“2”进入“AC建曲线”功能，出现如下界面： SET修改↓翻页 标样A1： 标样个数： 波长： 比色皿： 测建曲线 请将参比杯拉入光路！ 　　　ENT确认 参比测量后按“ENT”，出现： 请置入样品比色皿标号： 输入标号后，出现： 请将样品拉入光路！ 　　　ENT确认 按“ENT”确认，拉动拉杆，进入下一比色皿的测量。测量结束后，得到标准曲线，按“ESC”退回上一层界面。 请将参比杯拉入光路！ 　　　ENT确认 测量后，按“ENT”，出现： 请置入样品比色皿标号： 依次测量。 按“3”进入“置入曲线”，（此功能主要用于标准曲线做完后无法及时做样品测量，故记下曲线公式，在进行测量前直接输入曲线）页面如下： SET修改↓翻页 当前曲线：C= A+ 置入曲线 *