微生物的利用.docVIP

【考纲要求】 微生物的利用 考纲要求 具体内容 (1)进行微生物的分离和培养 (2)测定某种微生物的数量 (3)研究培养基对微生物的选择作用 (4)探讨微生物的利用 Ⅱ Ⅱ Ⅱ Ⅱ 实验内容 (1)培养基的配制 (2)高压蒸汽灭菌和干热灭菌 (3)倒平板操作 (4)平板划线操作和稀释涂布平板法 (5)应用选择培养基分离某种特定的微生物 实验与探究能力 【考点预测】 从近几年高考试题看，微生物的营养、培养基的种类和配制、进行微生物的培养与分离等 1．培养基及其无菌技术 2．应用选择培养基分离某种特定的微生物 3．有关的实验原理、方法、步骤和预测 本专题内容侧重考查学生的实际应用能力， 考查知识点分布主要集中在微生物的营养、培养基种类和配制、程序及其注意事项、无菌技 碳 源 氮 源 生长因子 水 无机物 概 念 凡能为微生物提供所需碳元素的营养物质 凡能为微生物提供所需氮元素的营养物质 微生物生长不可缺少的微量有机物 来 源 无机碳源：C02、NaHC03等；有机碳源：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等 无机氮源：N2、氨、铵盐、硝酸盐等；有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等 酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液 作 用 主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物；异养微生物的主要能源物质 主要用于合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物 酶和核酸的组成成分 溶剂、生化反应的介质 酶的成分、调节渗透压等 说 明 不同种类的微生物，对碳源的需要差别较大。例：甲基营养菌只利用甲醇、甲烷；假单胞菌利用90多种含碳化合物 对于异养微生物，含C、H、0、N的化合物既是碳源，又是氮源 微生物需要补充生长因子是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限 培养基的种类 划分标准 培养基种类 特 点 用 途 按物理性质 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 固体培养基 加凝固剂，(如琼脂) 微生物分离、鉴定，活菌计数，保藏菌种 按用途 选择培养基 培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物，如可用伊红一美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽) 无菌技术———消毒与灭菌 概 念 常用方法 应用的范围 消 毒 使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法：在100℃煮沸5～6 min 一般物品 巴氏消毒法：70℃～75℃煮 30 min或在80℃煮15min 对于一些不耐高温的液体，如牛奶 化学药剂消毒法 如用体积分数70％～75％的酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等 紫外线消毒：30 W 紫外灯照射30 min 接种室空气 灭 菌 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子) 灼烧灭菌：酒精灯火焰 接种工具的灭菌 干热灭菌：160℃～l70℃ 下灭菌1～2 h 玻璃器皿、金属工具的灭菌 高压蒸汽灭菌：121℃100 kPa条件下，灭菌15～30 min 培养基及容器的灭菌 4．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基操作分析 (1)培养基需冷却至50℃时开始倒平板 ①原因：琼脂是一种多糖，在98℃以上熔化，在44℃以下50℃则会烫手，低于50℃时若不能及时 ②估计培养基温度的方法是：培养基从灭菌锅中取出冷却 (2)平板倒置原因：平板皿盖上会凝结水珠，培养基表面的 5．纯化大肠杆菌操作过程中的注意事项 稀释涂布平板法 稀释涂布平板的操作比较复杂，且各个细节均需保证“无 ①酒精灯与培养皿的距离要合适。 ②吸管头不要接触任何其他物体。 ③吸管要在酒精灯火焰周围使用。平板划线法①操作第一步即取菌种之前及每次划线之前接种环都需 第一次操作 每次划线之前 划线结束 目 的 杀死接种环上原有的微生物 杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少 杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 ②从第二次以后的划线操作总是从上一次划线末端开始， 例1 某小组同学为了调查 (1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了和。除此之外，培养基还必须含有的基本：和。 (2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是。 (3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了中培养，37 ℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另