羟甲基糠醛的检测方法.docVIP

羟甲基糠醛的检测方法 5.10.1原理 样品中的羟甲基糠醛经HPLC反相色谱柱分离，用液相色谱仪紫外检测器检测、用标准曲线外标法定量。 5.10.2 试剂和材料 5.10.2.1 水:GB/T 6682规定的一级水。 5.10.2.2 甲醇:色谱纯。 5.10.2.3 甲醇溶液:10%，吸取100mL的甲醇到1000mL的容量瓶中，用水稀释至刻度。 5.10.2.4 标准物质:羟甲基糠醛纯度≥99%, 5.10.2.5 标准储备溶液:准确称取适量的羟甲基糠醛标准物质于100mL容量瓶，用10mL甲醇溶解，用水稀释至刻度，配成0.20mg/mL的标准储备液。此溶液可在温度低于4℃冰箱中冷藏保存两个月。 5.10.2.6 标准工作溶液:分别吸取适量的羟甲基糠醛标准储备溶液至100mL容量瓶中，用10%甲醇溶液释稀至刻度，配成0.10μg/mL,0.20μg/mL,1.0μg/mL,2.0μg/mL,4.0μg/mL,6.0μg/mL,10μg/mL标准工作溶液。当天新鲜配制。 5.10.3 仪器 5.10.3.1 高效液相色谱仪:配有紫外检测器。 5.10.3.2 分析天平:感量0.01g, 5.10.3.3 注射器:10mL, 5.10.3.4 过滤膜:0.45μm, 5.10.4 试样制备与保存 5.10.4.1 试样的制备 无论有无结晶的实验室样品，都不要加热。将其搅拌均匀，分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并做上标记。 5.10.4.2 试样的保存 将试样于室温下保存。 5.10.5 测定步骤 5.10.5.1 试样处理 称取10g试样，精确至0.01g，置于100mL烧杯中，加人10mL甲醇(4.2)，用玻璃棒轻轻搅拌均匀，使试样完全溶解。转移至lOO mL容量瓶中，用水释稀至刻度，充分混匀。用0.45μm的滤膜过滤，滤液用于液相色谱仪紫外检测器测定。 5.10.5.2 色谱侧定 5.10.5.2.1 液相色谱条件 a) 色谱柱:DiamonsilC18 5 μm,250mmX4.6mm（i.d)或相当者； b) 流动相:甲醇+水(10十90)； c) 流速:1.0mL/min； d) 检测波长:285nm； e) 柱温:30℃； f) 进样量:10μL。 5.10.5.2.2 液相色谱测定 首先测定七个标准工作溶液(4.6)在上述色谱条件下的峰面积，以峰面积对相应浓度绘制标准工作曲线，然后测定未知样品，用标准工作曲线对样品进行定量。样品溶液中羟甲基糠醛的响应值应在仪器的线性范围内。在上述色谱条件下，羟甲基糠醛的参考保留时间约为12min.羟甲基糠醛标准物质色谱图和含有羟甲基糠醛的样品色谱图参见附录A中图A.1、图A.2 , 5.10.5.3 平行试验 按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定。 5.10.5.4 空白试验 按上述步骤，对10%的甲醇溶液进行测定。 5.10.5.5 添加试验 每批样品应至少进行一个样品的添加试验。称取10g试样，精确至0.Olg，添加1.O mL羟甲基糠醛标准储备溶液，加9.9 mL甲醇溶解，其他步骤按试样处理步骤进行。 5.10.6 结果计算 结果按式(1)计算: 式中: X— 试样中羟甲基糠醛含量，单位为毫克每千克(mg/kg)； c— 从标准工作曲线上得到的被测组分溶液浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)； V— 定容体积，单位为毫升(mL)； m— 样液所代表试样的质量，单位为克(g)。 注:计算结果应扣除空白值。 5.10.7 精密度 本部分的精密度数据是按照GB/T 6379的规定确定的，其重复性和再现性的值是以95%的可信度来计算。 5.10.7.1 重复性 在重复性条件下，羟甲基糠醛的含量在2.0mg/kg-40mg/kg范围内，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限(r)，本部分的重复性限按式(2)计算: lgr=0.649 5lgm-1.3043 ··· ·· ··· · （2） 式中:m— 两次测定值的平均值，单位为毫克每千克(mg/kg)。 如果两次测定值的差值超过重复性限，应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。 5.10.7.2 再现性 在再现性条件下，羟甲基糠醛的含量在2.0 mg/kg-40m g/kg范围内，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限(R)，本部分的再现性限按式(3)计算: R=0.0682m+0.1243· ··· ·· ··· · ( 3 ) 式中:m— 两次测定值的平均值，单位为毫克每千克(mg/kg),