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基因突变的鉴定 (2010-07-05 17:37:50) 转载▼ 标签： 一． 植物形态突变的鉴定 经人工诱发或自然发生的变异是否属于真实的基因突变，是显性突变还是隐性突变，突变频率的高低等，都应进行鉴定。 1． 真实遗传变异的鉴定 ?? 变异有可遗传的变异，有不可遗传的变异。基因本身发生化学性质的变化而引起的变异是可以遗传的，因环境条件而导致的表现型变异是不遗传的。所以，在诱变处理材料的后代中一旦发现与原始亲本不同的变异体，首先要鉴定它是否真实遗传。例如，在农作物诱变育种过程中，某种高杆植物经理化因素处理后，在其后代中发现个别矮杆植株，这种变异究竟是基因突变引起的呢？还是由环境条件引起的呢？二者如何鉴别呢？ ?? 把变异体与原来的亲本种植在土壤条件和栽培条件均匀一致的环境下，若变异体与原始亲本的表现大体相似，即原来的变异消失了，说明它不是遗传的变异；反之，若变异体与原始亲本不同，仍然表现为矮杆，说明它是基因突变的结果。 2． 如何鉴别显性突变和隐性突变 ?? 利用杂交试验的方法，可以区分显性突变还是隐性突变。以上例而言，让矮杆突变体植株与原始亲本杂交，若F1表现高杆，F2中既有高杆，也有矮杆植株，说明矮杆突变是隐性突变。若是显性突变情况又如何呢？F1表现为矮杆，F2中矮杆：高杆为3：1。 3． 利用花粉直感现象估算配子的突变率 ?? 为了测定玉米子粒非甜籽变为甜粒（Su→su）的基因突变频率，以甜粒玉米纯合体作母本，用经诱变处理过的非甜粒纯合体的花粉授粉。 susu×SuSu ?? 在正常情况下，非甜（Su）对甜(su)为显性，授粉后的果穗应该完全是非甜粒种子，假如在果穗上发现甜粒种子，就可以认为是Su花粉经诱发处理以后发生了Su→su突变，并可计算出突变频率。 4． 如何鉴别禾谷类作物的体细胞突变 ?? 稻麦等禾谷类作物有分蘖存在，经诱变处理的种子长成的植株其体细胞突变往往只存在于个别分蘖上，因而只影响单个的穗子。假如是显性突变，很容易在M1代发现，M1按单穗分别收获，将M1中表现突变性状的穗子单独种植，M2如发生分离，还必须种植M3代，才能确定显性植株是纯合体还是杂合体。若是隐性突变，也必须分株、分穗收获，下一代按穗种植，即每一个M1穗上的子粒种成一行（M2），突变体在M2代同时表现、纯合。一般地说，鉴别工作在M2代即可通过。当然进一步的遗传研究是另一回事。 ?? 以大麦为例，说明隐性突变的鉴别过程。假定有一大麦植株有一个分蘖发生了隐性突变（A-a），其它分蘖保持原来的基因型（AA），但在M1代却没有表型特征，M1代成熟时按单穗分别收获，以便穗行播种。在M2代中，带有突变基因的那个穗行大约有四分之一的植株表现为突变性状（aa），其余的穗行都表现正常。隐性突变的鉴别到此就可以了。假如要做进一步的验证，可以将M2代按株收获，种成M3代株系。来自于M1代突变穗的那些M3中，将有2/4的株行又分离出1/4的突变体，说明它们在M2是Aa杂合体；1/4的株行完全表现为突变性状，它们在M2代就是aa纯合体，也有1/4的株系全部为正常性状，它们在M2代是AA纯合体。来自M1代非突变穗的那些株行当然表现为原来的性状。 二． 微生物中生化突变的鉴定 ?? 以x-ray或uv照射红色面包霉的分生孢子，可以诱发突变。让诱变过的分生孢子与相对交配型的野生型分生孢子融合（交配），产生分离的子囊孢子。从子囊中取出子囊孢子，分别培养在完全培养基上。突变型和野生型都能在完全培养基上生长和发育。从完全培养基上生长起来的菌丝体又形成分生孢子。取出一部分分生孢子培养在基本培养基上，观察他们的生长状况，若生长正常，表示没有发生突变，如果不能生长，表明可能发生了突变。到底发生了什么突变呢？还要继续分析。把突变型的分生孢子从完全培养基中取出来，分别培养在加入不同氨基酸或不同维生素的培养基中。若突变型在加入了某种aa的基本培养基中不能生长，说明这一突变与此aa无关，若突变型在加了某种aa的基本培养基中能正常生长，说明该突变型是合成该种aa的基因发生了突变，失去了合成这种aa的能力，在基本培养基（不含有这种aa）中不能生长，若加入该种aa，突变体就能生长。若该突变体在含有赖氨酸（lys）的基本培养基中能够生长，就将其命名为lys营养缺陷型，或赖氨酸依赖型（lys-），对应的野生型用lys+表示之。 三． 果蝇中突变基因的检测 Morgan等人在小小的果蝇中发现了几百种突变型，并用于遗传学研究。但是定量地检测新突变，还有赖于Morgan的学生Muller所发展的几种独创性技术。 现介绍用Muller-5技术检出果蝇x-chr.上的隐性突变，特别是致死突变的步骤。Muller-5品系，是人工创造的一个果蝇品系。它的X-chr.上带一个棒眼基因B，一个杏色眼wa和