颗粒裂解肽G13结域在大肠杆菌中的高效融合表达.docVIP

颗粒裂解肽G13结构域在大肠杆菌中的高效融合表达 刘小强, 查向东, 肖亚中, 杨金环, 李能树 安徽大学生命科学学院合肥 230039: 为高效表达颗粒裂解肽G13结构域并避免G13对宿主菌的毒性, 将人工合成的编码G13的基因片段, PCR扩增后克隆于原核表达载体pThioHisA中, 构建了重组表达载体pThioHisA-G13, 将其转化于大肠杆菌BL21(DE3)中, 经IPTG诱导表达融合蛋白Trx-G13, 表达产物以包涵体的形式存在, 其表达量约占细菌总蛋白的58%。包涵体蛋白经 8 mol/L尿素溶解后, 再经CNBr切割, 阳离子交换层析, 得到纯化的重组G13结构域。琼脂糖扩散法检测表明重组G13结构域多肽具有抗菌活性。 关键词: 颗粒裂解肽, G13结构域, 融合表达, 阳离子抗菌肽 Efficient fusion expression of G13 domain derived fromgranulysin in Escherichia coli Xiaoqiang Liu, Xiangdong Zha, Yazhong Xiao, Jinhuan Yang, and Nengshu Li Key Laboratory of