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旋覆花中鞣质的含量测定_药学论文 旋覆花中鞣质的含量测定_药学论文 作者：万祺 龙凌云 裴月湖 单俊杰【摘要】 目的测定旋覆花水提物中鞣质的含量。方法采用干酪素法和络合滴定法进行鞣质含量测定。结果干酪素法测定旋覆花中鞣质含量为5.96%，RSD＝1.68%（n=3）；络合滴定法测得含量为8.32%，RSD＝2.09%（n=3）。结论 该两种分析方法简便、准确，可用于旋覆花中鞣质的含量测定。 【关键词】 旋覆花 鞣质 干酪素 络合滴定 　　Abstract：ObjectiveTo determine the content of tannins in aqueous-extract in the flower of Inula japonica Thunb. Methods The casein method and complexometric titration were used to determine the content of tannins.Results The active tannin in the flower of Inula japonica was 5.96% by the casein method, and RSD=1.68% (n=3)； the total tannin of the flower was 8.32% by complexometric titration, and RSD=2.09% (n=3). ConclusionThe two methods are simple and accurate,and can be used to determine the content of tannin in Inula japonica Thunb. 　　Key words：Inula japonica Thunb.； Tannin； Casein； Complexometric titration 旋覆花为菊科植物旋覆花Inula japonica Thunb.或欧亚旋覆花Inula britannica L.的干燥头状花序，具有降气、消痰、行水、止呕等功效。中医临床多用于风寒咳嗽、痰饮蓄结、胸膈痞满、喘咳痰多、呕吐噫气、心下痞硬等症状［1］。旋覆花中主要有倍半萜内酯、三萜、甾体、黄酮和挥发油等成分［2～4］，目前尚无旋覆花中鞣质方面的报道。本实验室研究发现旋覆花（Inula japonica Thunb）水提物具有明显降血糖和降血脂作用［5］，检识反应表明水提物中主要含有黄酮、蒽醌、糖类和鞣质等成分。其中用三氯化铁反应鉴定旋覆花中鞣质，反应呈暗绿色，表明含有邻二酚羟基黄酮和儿茶素类缩合鞣质。本实验拟采用干酪素法和络合滴定法测定其中鞣质的含量。 鞣质含量测定方法有多种，其中最常用的有皮粉法、高锰酸钾法、干酪素法、络合滴定法、比色法和分光光度法。本实验选择干酪素法是基于干酪素能选择性结合有生理活性的鞣质，从而测定生理活性鞣质的含量，而无活性的鞣酐等鞣质不被测定［6］。络合滴定法是利用鞣质分子中多个邻位酚羟基可作为多基配体与一个中心离子络合，形成环状螯合物，在不同pH值下发生沉淀反应，通过用EDTA反滴定过量金属离子来确定总鞣质的含量。该法准确度和精确度高［7］。 因此拟采用该两种方法对旋覆花中鞣质进行定量分析。 　　1 器材 　　1.1 药材 　　旋覆花（Inula japonica Thub.）购于北京同仁堂药材公司，产地河北省。 　　1.2 试剂鞣酸（AR，北京化学试剂公司），干酪素（Sigma公司），基准氧化锌（北京益利精细化学有限公司）。铬黑T（北京市旭东化工厂 ），EDTA-2Na（ 北京欣经科生物技术有限公司），Folin试剂（钨酸钠 50 g，加入85％磷酸40 ml和蒸馏水375 ml，混合，加热回流3 h，冷后加水稀释至500 ml，避光保存。），0.1 mol/L醋酸－醋酸钠缓冲液（pH =5.0），其他试剂均为分析纯。 　　1.3 仪器紫外可见分光光度计（上海尤尼柯公司，型号2802PC），电子天平（十万分之一，赛多利斯，BP211D ） 。 　　2 方法 　　2.1 旋覆花水提物的制备旋覆花花序1 kg，加入95%乙醇8 L室温浸泡48 h。过滤，残渣再重复操作1次。醇提后的残渣挥干乙醇后，用10 L蒸馏水室温浸泡24 h。过滤，残渣再用水重复操作1次。合并水提液，50℃减压浓缩，浓缩液冷冻干燥获得水提物。 　　2.2 干酪素法［8］ 　　2.2.1 标准曲线的绘制精确称取鞣酸（真空干燥至恒重）43.84 mg置于200 ml容量瓶中，加入30%甲醇水溶液定容，摇匀，得到溶液I。精密吸取溶液I1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml分别置于 10