高中生物《第四章 第三节 酵母细胞的固定化》课件3 （新人教版选修1）.pptVIP

①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 ②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得　DNA最大限度地析出 ⑥使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 ⑦除去含DNA的滤液中的杂质 ⑧提取DNA ⑨A出现蓝色 B无变化 讨论 　　此实验过程中有几次过滤，几次析出？分别在哪一步？ 答: 整个实验共“两次过滤，两次析出” 　　此实验过程中有几次过滤，几次析出？分别在哪一步？ 讨论 两次过滤 两次过滤 第一次： DNA存在于滤液里 第一步 第二次： DNA存在于滤液里 第六步 　　过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关，第二次要用其滤出的黏稠物有关，所以要使用多层纱布，第一次和第三次均要用其滤液，使用的纱布为1－2层 两次过滤 第一次： DNA存在于滤液里 第一步 第二次： DNA存在于滤液里 第六步 ③两次析出 ③两次析出 第一次：用0.14 mol／L 的NaCI溶液 ③两次析出 第一次：用0.14 mol／L 的NaCI溶液 第三步 ③两次析出 第一次：用0.14 mol／L 的NaCI溶液 第三步 第二次：用冷却的95％的酒精 ③两次析出 第一次：用0.14 mol／L 的NaCI溶液 第三步 第二次：用冷却的95％的酒精 第七步 湖南长郡卫星远程学校 2012年上学期 制作 03 1.生物体的遗传物质是什么？ 讨论 2.真核生物的遗传物质存在于哪里？ 1.生物体的遗传物质是什么？ 讨论 2.真核生物的遗传物质存在于哪里？ 1.生物体的遗传物质是什么？ 3.怎样才能将真核细胞内的遗传物质 分离来？ 讨论 DNA的粗提取与鉴定 用什么材料提取DNA？为什么？ (一)实验材料的选取： (一)实验材料的选取： 鸡血细胞做实验材料。原因： 1. 鸡血细胞核DNA含量丰富，材料易得 2. 鸡血细胞极易吸水胀破 3. 植物细胞外有细胞壁，其他动物细胞制取DNA有时需匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长。 (二)破碎细胞，获取含DNA的滤液 1. 若是动物细胞，如何获取DNA滤液？ 2. 若是植物细胞，如何获取DNA滤液？ (二)破碎细胞，获取含DNA的滤液 1. 若是动物细胞，如何获取DNA滤液？ 加入洗涤剂和食盐的作用分别是？ 如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？ 加入洗涤剂和食盐的作用分别是？ 如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？ 洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA释放；食盐有利于DNA溶解 加入洗涤剂和食盐的作用分别是？ 如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？ 洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA释放；食盐有利于DNA溶解 会使细胞核内DNA释放不完全，提取DNA量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等 滤液中的杂质可能有哪些细胞成分？ (三)去除滤液中的杂质 可能有核蛋白、多糖和RNA等杂质。 (三)去除滤液中的杂质 滤液中的杂质可能有哪些细胞成分？ 　　根据DNA的理化性质，可以用哪些方法来去除滤液中的杂质？ (三)去除滤液中的杂质 　　为什么反复地溶解与析出DNA，能够除去杂质？(注意：两种食盐溶液的浓度和作用) (三)去除滤液中的杂质 (三)去除滤液中的杂质 　　为什么反复地溶解与析出DNA，能够除去杂质？(注意：两种食盐溶液的浓度和作用) 　　用高浓度的盐溶液能除去高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去在低盐溶液中的杂质。因此，反复溶解与析出DNA，就能除去与DNA溶解度不同的多种杂质。 析出： 滤液+同体积95%冷却酒精 　白色丝状物 (四)DNA的析出 (五)DNA的鉴定 如何鉴定？对比反应是为了证明什么？原理？ DNA＋二苯胺 蓝色物 沸水浴 (五)DNA的鉴定 如何鉴定？对比反应是为了证明什么？原理？ 三、操作提示 　　1. 以血液为实验材料，每100ml 加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。 　　2. 加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。 三、操作提示 　　1. 以血液为实验材料，每100ml 加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。 　　2. 加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。 　　3. 二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。 三、操作提示 　　1. 以血液为实验材料，每100ml 加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。 试 验 ①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 ①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 ②加速血细