实验九 血糖的定量测定 GOD-PAP法.pptVIP

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实验九 血糖的定量测定 GOD-PAP法.ppt

实验九 血糖的定量测定 —GOD-PAP法 实验目的 学习用GOD-PAP法测定血糖含量 实验原理 动物血液中的糖主要是葡萄糖,正常情况下,其含量较恒定。健康家兔的血糖水平为80-120mg/dL。 GOD-PAP法,即过氧化物酶-抗过氧化物酶法是近几年临床血糖定量测定普遍采用的方法。 葡萄糖氨基安替比林+酚醌亚胺+醌亚胺在A480nm~A550nm波长有最大吸收,所产生颜色的深浅与血清中葡萄糖的量成正比。在同样条件下,测定葡萄糖标准液和样品的光吸收值,代入后面所给的公式即可求出样品中葡萄糖的含量。 器材 1、试管; 2、试管架; 3、恒温水浴 4、721型分光光度计 5、0.1mL微量吸血管 试剂和材料 1、血糖试剂盒 使用时,将90mL磷酸缓冲液与10mL酶制剂混匀即可。称此混匀的溶液为工作液。每一剂盒装有2瓶磷酸缓冲液和2瓶酶制剂 2、样品(兔血清) 实验流程 试管1(空白)+3ml工作液+0.02ml重蒸水 试管2(标准)+3ml工作液+0.02ml葡萄糖标准液 试管3(样品)+ 3ml工作液+0.02ml样品 摇匀,37℃保温10-15min 光程1.0cm比色杯,在A480nm~A550nm波长比色 计算 式中: c为样品中葡萄糖的浓度; A标准为葡萄标准液在A480nm-A550nm波长的光吸收值; A样品为待测样品在A480nm-A550nm波长的光吸收值; C标准为葡萄糖标准液中葡萄糖的浓度。 * *

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