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微生物工程复习.doc
名词解释
巴斯德效应:有氧条件下,发酵作用受抑制的现象(或氧对发酵的抑制现象)SHAM)敏感,不产生ATP,不抑制PFK;缺氧导致侧呼吸链不可逆失活,柠檬酸产率急剧下降。
协同反馈抑制:在分支代谢途径中,几种末端产物同时都过量,才对途径中的第一个酶具有抑制作用。若某一末端产物单独过量则对途径中的第一个酶无抑制作用是指从生物合成途径分析,一种氨基酸的合成受到另一种完全无关的氨基酸的控制,而且只有当该氨基酸浓度大大高于生理浓度时才能显示抑制作用。因丧失合成某些生活必需物质的能力,不能在基本培养基上生长的,突变型菌株。营养缺陷型auxotroph 指微生物等不能在无机盐类和碳源组成的合成培养基中增殖,必须补充一种或一种以上的营养物质才能生长。
氧饱和度=发酵液中氧的浓度/临界溶氧溶度;所以对于微生物生长,只要控制发酵过程中氧饱和度1。
供氧阻力:空气中的氧气从空气泡里通过气膜、气液界面和液膜扩散到液体主流中。
氧膜阻力1/k1。气液界面阻力1/k2。液膜阻力1/k3。液流阻力1/k4。
耗氧阻力:指氧分子自液体主流通过液膜、菌丝丛、细胞膜扩散到细胞内。
细胞周围液膜阻力 1/k5。菌丝丛或团内的扩散阻力1/k6。细胞膜的阻力1/k7。细胞内反应阻力1/k8。
填空
选择判断
由葡萄糖(C6H12O6)生成柠檬酸(C6H8O7)的途径中,柠檬酸发酵对糖的理论转化率为: C
A.50 % B。100% C。106.7% D。都不对
(理论转化率:酒精=100%,乳酸100%,柠檬酸100%)
哪些属于糖嫌气性发酵产物积累机制
酒精;甘油;乳酸
柠檬酸合成中黑曲霉对Mn2+要求是: 缺乏时柠檬酸多
A、过量 B、适量 C、亚适量 D、无关
核苷酸合成中,嘌呤核苷酸的前体物是: B
A、XMP B、IMP C、AMP D、GMP
用营养缺陷型菌株生产赖氨酸,培养基中苏氨酸Thr含量过高会导致: A
A、天冬氨酸激酶(AK)被协同反馈抑制
B、高丝氨酸脱氢酶受反馈抑制
C、赖氨酸合成的相关酶系受抑制
D、苏氨酸合成的相关酶系被抑制
当黑曲霉在缺Mn2+的产柠檬酸培养基中,菌体的组成代谢(戊糖磷酸途径、生成葡萄糖途径)酶和三羧酸循环的脱氢酶的活力显著降低。
缺Mn2+时HMP和TCA循环酶水平低,生长期菌丝体的蛋白质、核算和脂肪含量明显减少,氨基酸和NH4+水平升高,丙酮酸和草酰乙酸水平升高。
Mn2+的效应时通过NH4+水平升高而减少柠檬酸对PFK的抑制,NH4+水平升高是因为Mn2+缺乏使蛋白质和核算合成受阻。
正常生理浓度范围的柠檬酸和ATP对调节酶(PFK)有抑制作用。
综合题
简述黄色短杆菌赖氨酸生物合成的调节机制。
赖氨酸生物合成的调节机制:
(1)只有一种天冬氨酸激酶(AK),而不是三种同功酶。
(2)协同反馈抑制
① AK是变构酶,具有两个变构部位,可以与终产物结合,受终产物影响;
② 当只有一种终产物(赖氨酸或苏氨酸)与酶变构部位结合时,酶活性不受影响;
③ 当有两种终产物(赖氨酸和苏氨酸)同时过量存在,即两种终产物同时与酶两个变构部位结合时,酶的活性受到抑制,
(3)分支点处的代谢调节
①第一个分支点:
由于高丝氨酸脱氢酶活性比DDP合成酶约高15倍,所以代谢优先向合成高丝氨酸方向进行。分支途径第一个酶(DDP合成酶)和第二个酶(DDP还原酶)均不受赖氨酸反馈抑制和阻遏。
②第二个分支点:
琥珀酸高丝氨酸合成酶活性>高丝氨酸激酶活性,优先合成蛋氨酸;
当蛋氨酸过剩时,阻遏琥珀酸高丝氨酸合成酶的合成,代谢流转向合成苏氨酸方向进行;
当异亮氨酸过剩时,反馈抑制苏氨酸脱氨酶,就积累苏氨酸。
由于苏氨酸过剩,反馈抑制高丝氨酸脱氢酶,使代谢流转向合成赖氨酸。
赖氨酸和苏氨酸同时过剩,协同反馈抑制天冬氨酸激酶,使整个途径停止进行。
嘌呤核苷酸的全合成途径
分解代谢产物的调节控制
(1)葡萄糖效应:
在有葡萄糖和第二种碳原的培养基中,葡萄糖首先被利用,抑制抗生素的生物合成,只有当葡萄糖耗尽时,利用第二种碳源的酶开始形成,并同时解除对抗生素生物合成的抑制。
(2)分解代谢产物调节的机制:
①青霉素合成中:
葡萄糖分解产物阻遏三肽酶的合成,其效应物可能是一种葡萄糖磷酸化衍生物;
头孢菌素生物合成受葡萄糖明显阻遏,使青霉素N不能转化为头孢素C;
葡萄糖也阻遏青霉素环化酶,使它不能把ACV三肽转化成青霉素C。
②在放线菌素合成中:
0.1%葡萄糖+1%半孔糖→30h葡萄糖用尽;
20h内不合成氧化吩嗪酮合成酶,但20-36h该酶活力增加6倍,40h后为12倍;
24h后
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