实验六 微生物大小及数量的测定.ppt

目镜测微尺的校正 血球计数板计数 * * 实验 6 酵母菌大小的测定 ? 一、实验目的和内容 目的：学会测微尺的使用和计算方法及对单细胞微生物的测量。 内容：1. 学会并掌握测微尺的使用。 ? 2．测定酿酒酵母菌体的大小。 二、实验材料和用具 ??? 酿酒酵母菌悬液 ???? 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。 镜台测微尺 目镜测微尺 目镜测微尺每格实际代表的长度随物镜的放大倍数而改变，也会因使用不同的显微镜而产生误差，因此在使用前必须用镜台测微尺进行校正。 三、操作步骤 l． 目镜测微尺的标定 把目镜的上透镜旋开，将目镜测微尺轻轻放在目镜的隔板上，使有刻度的一面朝下。将镜台测微尺放在显微镜的载物台上，使有刻度的一面朝上。先用低倍镜观察，调焦距，待看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度相平行，并使两尺左边的一条线重合，向右寻找另外一条两尺相重合的直线。 2．标定公式： 计算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。由于镜台测微尺的刻度每格长10μm，所以可得： 目镜测微尺每格长（μm）=? 两条重合线间镜台测微尺的格数×10 两条重合线间目镜测微尺的格数 ? 三、操作步骤 3．菌体大小的测定 将镜台测微尺取下，换上酿酒酵母玻片标本，分别在低倍镜和高倍镜下找到目的物，测量10～20个菌体的长和宽占目镜测微尺的格数，再以目镜测微尺每格的长度计算出菌体的长和宽。记录结果,求出平均值。 镜台测微尺的玻片很薄，如需标定油镜头时，要格外注意，以免压碎镜台测微尺或损坏镜头。 思考题 为什么不同放大倍数的目镜和物镜必须分别进行标定？ 酵母菌数量的测定 ? 一 、目的要求 1．明确血球计数板计数的原理。 2．掌握使用血球计数板进行微生物计数的方法。 二 、 基本原理 用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台；中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，各列有一个方格网，中间的大方格即为计数室。计数室的刻度一般有两种规格，一是大方格分成25个中格，而每个中格又分成16个小格；另一种是大格分成16个中格，而每个中格又分成25个小格，每个大格中的小格都是400个。每一个大格边长为lmm，面积为lmm2，盖玻片与载玻片之间的高度为0.lmm，故计数室的容积为0.lmm3。 ??? *