家蚕dpp基因的克隆和表达研究.pdfVIP

家蚕dpp 基因的克隆和表达研究 1,2 1 1 2 钱平 吴阳春 徐安英 鲁成 1 2 （中国农业科学院蚕业研究所，镇江 212018； 西南大学 农业部蚕桑学重点实验室，重庆 400716） 摘 要 dpp 基因是昆虫发育过程中的关键基因，在果蝇胚胎发育中，dpp 基因参与胚胎背-腹 轴的分化、体节的形成、并指导果蝇翅膀和复眼视网膜的形成。利用家蚕EST 数据克隆了家蚕 dpp 基因Bmdpp，其克隆的mRNA 全长1437 bp，ORF1146bp，编码381 个氨基酸的蛋白，预测分 子量为38.6kD，等电点为9.18。通过半定量RT-PCR 对Bmdpp 在家蚕各组织和各个发育时期的 表达情况进行调查。结果表明Bmdpp 基因在所检测的家蚕各组织均有表达；在对不同胚胎发育 时期表达情况的调查发现，在受精6h-14h 表达量很低，甚至没有表达。这一表达模式和果蝇 dpp 基因在胚胎发育过程中的表达模式相似，推测Bmdpp 在家蚕早期胚胎发育背-腹轴的分化中 起作用。将Bmdpp 基因完整CDS 序列亚克隆到pET-28a(+)表达载体，转化，诱导。经SDS 电泳诱导菌检测到约40 kD 与预测分子量相符的目的蛋白带。 关键词 家蚕 胚胎发育 dpp 体节基因 Cloning and Expression Analysis of Bmdpp in Silkworm ，Bombyx mori 1 1 1 2 QIAN Ping WU Yang-Chun XU An-Ying LU Cheng 1 2 （Jiangsu University of Science and Technology, Zhenjiang Jiangsu 212018 ；Key Laboratory of Sericulture of the Agriculture Ministry,Southwest University,Chongqing 400716) ABSTRACT Dpp gene play a pivotal roles in the embryonic development of insects.During the embryonic development of Drosophila, Dpp is responsible for dorsal/ventral polarity, functions segmental compartments., and encodes a morphogen which responsible for the progression of the wing and the retina of Drosophila.The cloning of silkworm dpp homologous gene, Bmdpp. The cloned mRNA length of the Bmdpp gene is 1437bp, comprised an open reading frame of 1146 bp which coding for a protein of 381 amino acids,the molecular weight of the BmDpp protein in dif