超氧化物歧化酶的提取技术_下_.pdfVIP

生意通 超氧化物歧化酶的提取技术（下） □唐玉章 下加热数分钟其活性丧失很少 如果离 一 动物来源 的制法 ， 、 SOD 子强度很低 则即使加热至 活性损 ， ， 95℃ 从动物血红细胞制备 SOD 自1969 失也不多 因此 在制备过程中可采取加 。 ， 年McCond 和 Fridovich 首次从牛血红细 热的方法去除杂蛋白 常用的反应温度 。 胞中发现 以来 已建立了从动物血 ， SOD 和相应的作用时间为 、 ， 55℃ 15～30min 红细胞中提取纯化 的多种方法 其 SOD 。 、 ， 、 。 为了进 60℃ 10~25min 65℃ 10~20min 基本工艺流程为 血液预处理 洗涤红细 ： ， 一步增强热变性的效果 也可以进行两 ， 胞和溶血 去除大部分杂蛋白得 粗 ； SOD 次热变性 牛血溶血液于 加热 。 75℃ 品 再经柱层析分离得到精品 根据去除 ； 。 冷却后离心去血红蛋白 上清液 15min ， 。 杂蛋白所采用的方法不同 可以将现有 ， 加 倍体积丙酮 离心 沉淀用水溶解 ， ， ， 15 工艺基本分为以下几种。 即得 粗品液 粗品液于 再加热 SOD 。 65℃ 1.盐析法 离心后所得上清液经 层析 生 ， 10min DE32 牛血红细胞溶血后 利用乙醇 氯仿