15种单味中药粗提物体外抗伪狂犬病毒作用地研究.pdfVIP

325 《中兽医学杂志》2009年增刊 西洋参为君，甘温益气，健脾养胃。臣以苦温之自术，健脾燥湿，加强益气助运之力； 佐以甘淡茯苓’。健脾渗湿，’苓术相配，则健脾祛湿之．功益著’。。使以炙甘草，益气和中， 调和诸药。加之黄芪补气血，五药配伍，共奏益气健脾之功。加味四君子汤治疗后实验 犬精神有明显好转，采食量大增，大便成形，‘采血量增加，血液生理生化指标都有较好的恢 复。说明加味四君子汤对脾虚证动物治疗有一定效果，为中医临床诊疗提供新的方法和理论 数据。 参考文献： 64． —184． [3]姚荣顺，张永禄．加昧四君子汤新用举隅[J]．现代中医药，2009，29(1)：43—44． 作者简介：李盛强(1983-)，男，现为华南农业大学中兽医专业在读硕士研究生，主要从事中兽医基础理论的 研究。E-mail：gaoshidou@tom．corn 通讯作者：郭世宁，E-mail：shining@scau．edu．ca，电话：020 15种单昧中药粗提物体外抗伪狂犬病毒作用的研究 仇微红李雪石达友郭世宁’ (广州天河华南农业大学，510642) 感染伪狂犬病病毒后，引起母猪发情障碍、流产、产死胎、木乃伊胎和弱仔…。伪狂犬病病 毒先天感染或早期感染引起哺乳仔猪的神经症状和高死亡率，对育肥猪来说，伪狂犬病是呼 吸系统疫病综合征(PRDC)的重要病原，引起生长育肥猪的呼吸系统症状和生长迟缓；对种猪 场来说，伪狂犬病呈阳性对于种猪的销售和品牌效应造成不利影响；对出口企业来说，猪场 伪狂犬病呈阳性面临着经济和贸易的双重损失。 目前，中国伪狂犬病的控制与净化仍然任重道远，虽然在2006年中国许多猪场特别是一 些规模化种猪场对于伪狂犬病的净化付出了诸多努力，几乎所有猪场都进行了疫苗免疫，但 是由于生物安全措施不严、疫苗质量参差不齐、随意引种等原因，伪狂犬病仍然在中国猪场 呈流行性发生。 中药具有抗病毒和免疫调节等作用，尤其是对病毒病和慢性疾病的预防和治疗具有独特 的优势。部分中药可通过阻断病毒繁殖过程中的吸附、穿入、复制、成熟中的一个环节而直 接杀灭病毒，而另一些中药可调节机体平衡，增强机体细胞及体液免疫功能，从而间接抑制 病毒增殖；还有一些中药可诱发机体产生干扰素或IL_1等；而且由于中药多为天然药物，药 性温和，不良反应少，使开发治疗猪伪狂犬病的中药制剂成为可能陷1。本试验应用了M1vr法口’ 钆引探讨了15种单味中药的抗病毒效果，报道如下。 1材料 326 《中兽医学杂志》2009年增刊 1．1测试药物 黄芪、板蓝根、半支莲、千里光、金银花、大青叶、连翘、香薷、鱼腥草、 地胆草、野菊花等单味中药15种，购自广州市二天堂大药房。 1．2细胞PK细胞，由广东省农科院兽医所提供。 1．3病毒弱毒苗 州展晨生物技术有限公司。 1．6其它离心管，微量移液器，倒置显微镜，Bio．Rad680酶标仪。 2方法 2．1中药的提取 过后合并。减压旋转蒸发粗提液，定容到50ml(1：1)醇提液。 蟾酥lg经80％酒精加热提取，醇体积为药材的200倍，减压旋转蒸发提取液，定容到 100ml(1：100)醇提液。 ml(1：100)醇提液。 冰片19经80％酒精溶解提取，定容至100 黄芩粗粉509水提，水煎两次，每次沸腾30min，合并两次煎液，常压真空抽滤及浓缩， 调PH=7．2定容至50mI(1：1)水煎液。 黄芪、板蓝根、半支莲、千里光、金银花、大青叶、连翘、香薷、鱼腥草、地胆草、野 菊花各50 g水提，水煎两次，每次煮沸30rain，合并两次煎液，常压真空抽滤及浓缩，’定容 至50 ml(1：1)水煎液l¨。 ml 将上述中药提取液于110℃，15min两压灭菌。1．5eppebdorf分装完毕后-20。C保存备 用。 2．2中药对细胞毒性的测定取PK细胞生长成单层的96孔细胞培养板，弃去旧液，每孔加 二孔吹打混匀，吸出100p1加入第三孔，重复上述操作至第10孔，对中药进行2倍系列稀释。