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河北省迁安一中高二生物 操作程序学案 新人教版 例1 构建基因组DNA文库时，首先雷分离细胞的A、染色体DNA?? B、线粒体DNA?? C、总mRNA?? D、tRNA?2．下列获取目的基因的方法中需要模板的是(　　) ①从基因文库中获取目的基因　②利用PCR技术扩增目的基因　③反转录法　④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成DNA A．①②③④ B．①②③C．②③④ D．②③ 下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答： (1)在基因工程中，A→B为________技术，利用的原理是________，其中①为________过程。 (2)B→C为抗虫棉的培育过程，其中③过程常用的方法是________。要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体生物学水平上的鉴定过程：________________________________________________________________________ 例3 如图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、Bam HⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tetR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、Bam HⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答： (1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有_______________ _、______________________________、____________________________三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行________。 (2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________________________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是___________(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是________________，其合成的产物是________________。 (4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是_______________________。 下列哪项不是基因表达载体的组成部分(　　) A．启动子 B．终止密码C．标记基因 D．复制原点 日本下村修、美国沙尔菲和钱永健因在发现绿色荧光蛋白(GFP)等研究方面作出突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP在紫外光的照射下会发出绿色荧光。依据GFP的特性，你认为该蛋白在生物工程中的应用价值是(　　) A．作为标记基因，研究基因的表达B．作为标记蛋白，研究细胞的转移 C．注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠D．标记噬菌体外壳，示踪DNA路径 某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a，通过基因工程的方法，将基因a与载体结合后导入马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。下列有关这一过程的叙述不正确的是A．获取基因a的限制酶的作用部位是图中的① B．连接基因a与载体的DNA连接酶的作用部位是图中的② C．基因a进入马铃薯细胞后，可随马铃薯DNA分子的复制而复制，传给子代细胞 D．通过该技术人类实现了定向改造马铃薯的遗传性状2．人们试图利用基因工程的方法，用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程是： 甲生物的蛋白质―→mRNA目的基因与质粒DNA重组导入乙细胞获得甲生物的蛋白质下列说法正确的是(　　) A．①过程需要的酶是逆转录酶，原料是A、U、G、C B．②要用限制性内切酶切断质粒DNA，再用DNA连接酶将目的基因与质粒连接在一起 C．如果受体细胞是动物细胞，③过程可用农杆菌转化法 D．④过程中用的原料不含有A、U、G、C 萤火虫能发光是因为萤火虫体内可以通过荧光素酶催化的系列反应所产生的现象。如果荧光素酶存在于植物体内，也能使植物体发光，一直以来荧光素酶的唯一来源是从萤火虫腹部提取的。但加利福尼亚大学的一组科学家成功地通过基因工程实现了将荧光素酶基因导入到大肠杆菌体内，并在大肠杆菌体内生产荧光素酶。请你根据已知的知识回答下列有关问题： (1)提取目的基因通常有两种途径，提取该目的基因的方法最可能的途径是_________ (2)在该过程中需要多种酶的参与，其中包括________________等。 (3)下列可作为受体细胞的生物有(多选)(　　) A．土壤农杆菌 B．结核杆菌C．噬菌体 D．枯草杆菌