动物胚胎冷冻保存技术的研究进展.pdfVIP

安徽农学通报，Anhui 6l A咖．Sci．Bull．2011，17(01) 动物胚胎冷冻保存技术的研究进展 邵智骅1 葛善勇1 江喜春2+ (1绩溪县畜牧兽医局，安徽绩溪245300；2安徽省农业科学院畜牧兽医研究所，安徽合肥230031) 摘要：分析了动物胚胎冷冻保存的机理，综述了几种常见的动物胚胎冷冻保存方法的研究进展，并对动物胚胎玻璃 化冷冻保存技术的发展前景进行了展望。 关键词：胚胎；冷冻保存；玻璃化冷冻；进展 中图分类号$852．1 文献标识码A 文章编号1007—773l(2011)0l一61一03 The ofAnimal Research Progress EmbryoCryopreservation ShaoZhihualeta1． Jixi BureauofAnimal and (1 County HusbandryVeterinary，Jixi245300。China) the ofanimal mechanism severalmethodsofanimal Abstract：Thispaperanalyzes embryoeryopreservation，displays embryo makes in a 011the ofthe ofanimal vitrification cryopreservationdetail，and prospectprogresstechnology embryo eryopreserva— tion． Keywords：Embryo；Cryopreservation；Vitrification；Progress 动物胚胎的冷冻保存技术不仅为动物种质资源的保 胞将不受伤害。胚胎在冷冻过程中，大约在一lO℃以上细 存和良种家畜的国际交流提供了简单的手段，而且还是胚 胞内不结冰，但处于过冷状态的胞质产生溶液效应和细胞 胎移植、体外受精、转基因和克降等胚胎生物技术不可分 内外化学势差异，导致胞质水分在胞内和胞外冻结，这2 割的重要组成部分。1985年Rail等…率先将玻璃化冷冻种情况谁占优势对细胞存活至关重要。温度降到一10℃ 方法用于小鼠胚胎的冷冻保存之后，玻璃化冷冻保存技术 以下时过冷的胞质就会形成冰晶，胚胎在冷冻过程和解冻 经过不断改进和完善，现今已成功应用于牛、绵羊、山羊、 过程中2次通过易形成冰晶的危险温区(一15℃一一 兔等家畜的实际生产中心1，有力地推动了该方法在哺乳动 50℃)，采取适当的冷冻方法和低温保护剂，使胚胎安全通 物胚胎冷冻保存中的应用。 过危险区，是冷冻胚胎成功的关键。 l动物胚胎冷冻保存机理 2动物胚胎冷冻保存的方法 当生物细胞在水溶液中冷却时，温度一般先降到细胞 胚胎冷冻方法根据降温方法的不同，可分为缓慢降温 和培养液的冰点以下，然后才发生冻结，即细胞和培养液 法和快速降温法(玻璃化冷冻法)。缓慢降温法是指将用 均处于过冷状态。在大多数情况下，细胞的过冷程度比周 冷冻保护剂处理过的胚胎。利用由计算机控制降温速度的 围溶液更深，细胞外溶液先结冰，使溶质浓缩，导致细胞外 胚胎冷冻仪，首先从室温以一lqC／min的速度降温至植冰 环境渗透压升高。如果降温足够慢，可以通过脱水来维持 温度一7℃，保持10rain。植冰后再以一0．36C／rain的速度 细胞内外环境渗透压平衡。但是如果降温过慢，细胞长时 降温至一30℃，然后直接投入液氮中长期保存。这种缓慢 间处于高渗环境中，对细胞产生渗透休克；如果降温过快，