II型猪圆环病毒PCR检测方法的建立及试剂盒的研制.pdfVIP

业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2005,13 (4): 489~492 ·研究论文· 猪 型圆环病毒检测方法的建立及应用 焱 王凯民 张常印 (江苏出入境检验检疫局, 南京21000 1) ： 设计并合成 摘要 根据GenBank 上已发表的 型猪圆环病毒 (PCV-2) 的基因序列， 1 对能特异性扩增 型猪圆环病毒 ( ) 的引物，建立了PCR 方法检测 并研制出试剂盒。然后对试剂盒的敏感性、特异性和有效期进行了研 。 究。结果表明，该试剂盒 能扩增出 ，具有很好的特异性 PCR 方法可检测出0.5 pg 的模板DNA 。试剂盒经过反复冻融 后，不影响其检测效果。有效期在-20 ℃至少可以保存 1 年。 ： ；敏感性 关键词 型猪圆环病毒；PCR ；试剂盒；特异性 Construction of PCR for Detection of - (PCV-2) and Its Application JIANG Yan WANG Kai-Min ZHANG Chang-Yin On the basis of published genomic sequence of - (PCV-2) in the GenBank, a pair of primers for amplification specified fragment were designed and PCR assay for detection was constructed. Then, the kit to detect PCV-2 was studied. The experiments of kit ’s sensitivity, specificity and expiration date were done. The result suggested the kit could only detect PCV-2 and had high specificity. It could inspect 0.5 pg DNA template. After the kit was freezed-thawed many times, its detecting function was not effected. It could store at least for one year at -20 ℃. - ; kit; sensitivity; specificity 猪圆环病毒( , PCV)属圆环病 成巨大的经济损失。血清学调查发现，欧洲和加拿大 毒科圆环病毒属成员，为无囊膜的单股环状负链 等国家的家养和野生猪群中PCV 抗体阳性率高达 DNA 病毒，病毒粒子直径约 17～20 nm ，二十面体 95% ，约5%~ 15%的断奶仔猪出现症状，部分感染猪 对称，是迄今已知的最小的动物病毒之一(殷震和刘 群死亡率高达40%(Allan , 1998 ；Edwards , 景华，1997