乳头瘤病毒的PCR检测及临床意义进展.pdfVIP

j BuMMA口工z∈综述 ■—■■■■—■——■■■■■——■■■■■●■—■一111|I● 巴H工NA94EALTH工N口UBT口Y 乳头瘤病毒的PCR检测及临床意义进展 韩小娟 河南省焦作市妇幼保健院检验科，河南焦作454100 【摘要】人乳头瘤病毒(HPV)是女性子宫颈癌的一个危险因子，研究表明，反复被HPV感染容易引起宫颈癌。由于HPV至今为止 还无法在体外培养，检测手段主要以分子生物学方法为主。本文对各种HPV的PCR检测技术作简要分析，并描述其临床意义。 【关键词】乳头瘤病毒；模板扩增技术；临床意义；进展 【中图分类号】R374 【文献标识码】A 【文章编号】1672—5654(2013)09(a)-0190-02 viru s)是一种致癌的正二十而体 用引物进行PCR扩增，这种检测方法的效率比较高，一次检测就 乳头瘤病毒(Papilloma DNA病毒，直径大约60毫微米，属乳多空病毒科，能引发多种哺能检测几个基因型别。退火时候的温度要提高，这样就不会发生 乳动物的乳头瘤。对人类致病的主要是人乳头瘤病毒，所以本 错配，防止假阳性率的升高。因为在这种检测手段中引物错配的发 文主要介绍人乳头瘤病毒。人乳头瘤病毒(HPV)是一种无包生率是非常高的。在这种检测手段进行过程中，产物的大小是影 膜的球形20面体DNA病毒，属于乳头瘤病毒科。HPV包含大约响检测结果出来效率的一个非常重要的方面，如果产物比较小，得 8000bp的双链DNA，主要分为早期区、晚期区和调节区i个区出结果的效率也比较高。所以，在此方法检测时，需要通过灵敏度 域。HPV造成的损伤主要受细胞介导免疫因子的影响…。人体被 的大小来估计产物的大小，如果需要的效率较高，那么产物应该 HPV感染后，容易出现疣，多在皮肤发生，受人体免疫机制调节， 设计的小一些。 感染时间较长后一般自行消退，如果患者有免疫抑制或免疫缺 2．2实时荧光定量PCR 陷，疣或宫颈癌的发病率会增高。HPv会导致人皮肤、黏膜鳞 实时荧光定量PCR(realtimePCR)是以定性PCR为基础而 状上皮细胞增殖，病毒一旦侵入皮肤、黏膜后，就潜在表皮内的 发展起来的DNA定量技术。当前的技术手段，科学家不能在同 基底细胞，等到时机成熟就使人致病。该病毒一般使人发生局 一个扩增实验管里面使用多个型别的引物，但是通过引物的大小 部感染，病毒类型不同感染部位也不一样。现在学者普遍认为， 来实现荧光的定量扩增。单个通道的检测手段，操作非常简洁， HPV是女性宫颈癌的一个重要的危险因子[2】，由于此病毒无法在 实验室环境要求不高，需要的荧光剂不多，只要一种，这种方法只 体外进行培养，现有多种乳头瘤病毒的PCR检测手段来尽早对宫 能检测出一个基因性别。另外一种是多通道的扩增手段，多通道 颈疾病(子宫颈癌)的发生进行初步诊断。本文对这些检测技术的 的方法操作比较复杂，实验室的环境要求也比较高，操作步骤很 进展进行简要阐述。 繁琐。但是这种方法一次性可以检测几种基因型别。标本在标准 1 HPV与子宫颈癌的关系 化处理后，排除抽样误差。本方法的缺点是操作比较繁琐，并且 当前，对于很多女性来说，子宫颈癌是一种常见恶性肿瘤，全 球每年大概新增60万个病例，而其中中国占30％，在贫困地区，这点是使用全自动的方式对目标DNA进行提取、纯化、PCR扩增和 一数据可能要更高。临床上特别需要研发一类使用方便，费用低 DNA杂交，可有效的避免因认为因素而引起的误差。 廉，操作简单的诊断技术。临床上认为感染HPV中的高危型病毒， 2．3型特异性PCR 是子宫颈癌发病的重要原因之～。宫颈癌的发生是一个逐级递增 型特异性PcR一次只能够检测一类基因型，它是只对一种型 的过程，每一期发生和发展的过程比较缓慢，也可呈现可逆性或自 别的HPV设计的特异性引物进行PCR扩增，并可具体判定其基因 行消退，但此过程常持续数年或十余年。因此，国际社会和权威机 型的类别，这种方法一次性可以检测几种基因型别，只有设计多 构普遍认为确定早期筛查HPV是防治子宫颈癌最重要的