RNA干扰人脐静脉血管内皮细胞组织因子基因表达.pdfVIP

南方医科大学学报(JSouthMedUniv) ·1831· RNA干扰人脐静脉血管内皮细胞组织因子基因表达 唐 雯 1．4，杨红玲 ，李易娟 ，刘关娜 ，孙学刚 ，封志纯 (中山大学附属第_医院儿科，广东 广州 510080；广 州市妇婴医院，广东 广州 510080；s南方医科大学中医药学院中医症候实验室，广东 广州 510515；北京八一 儿童医院，北京 100700) 摘要 ：目的 利用 RNA干扰技术沉默脐静脉 内皮细胞 中组织因子基 因，实现瞬时沉默 ，为进行组织因子 (TF)表达干扰 的体内试验进行探索。方法设立3种处理方法：①空白未干扰；②假干扰；③IA干扰，每种实验方法各有3个样本。 将合成的人组织因子基因(NM 001993)干扰片段 shRNA序列，扩增 、提取 、测序正确后，转染至人脐静脉血管内皮细 胞 (HUVECs)，分别对 3种处理方法后 TF基 因沉默前后mRNA的表达采用 Gel—ProAaatyzer软件进行区带灰度值扫 描并分析、TF蛋白水平的表达采用免疫荧光检查进行观察。结果shRNA转染到HUVECs后TFmRNA的表达处理间 差异显著，F=27．657，P=0．001，未干