TGFβSmad信号通路在胃癌发展中的角色转换及机制研究百替生物.pptVIP

报告人：KITA 2014-10-17 TGF-β/Smad信号通路在胃癌发展中的角色转换及机制研究 背景介绍 TGF-β首先结合II型TGF-β受体（TβRⅡ）， 然后募集并磷酸化I型TGF-β受体（TβR I），活化的受体随后磷酸化受体活化介导的Smads（R-Smads），磷酸化的R-Smads再与共同介导的Smads（Co-Smads）即Smad4结合，形成异源寡聚体复合物，然后转位进入核内，直接与DNA结合或与其它DNA结合蛋白一起发挥转录因子作用，调节特异性靶基因的转录；另一方面，抑制性Smads（I-Smads），包括Smad6和Smad7，可拮抗受体介导的Smads信号传递，形成控制TGF-β反应的负反馈环路。 Smads蛋白含400-500个氨基酸，其一级结构分为3个功能区：高度保守的N端的MH1区C端的MH2区及中间富含脯氨酸的连接区 MH2区是功能效应区，可被TβRI识别并被磷酸化MH1区是MH2区的功能抑制区连接区含有几个磷酸化位点，致使Smads信号通路与其他信号MAPK信号通路有交联反应。 检测胃癌不同阶段中Smad蛋白的表达变化，分析其变化规律，明确起主导作用Smad蛋白； 通过胃癌细胞株模型，在细胞分子水平上分析TGF-β/Smad通路的网络调控关系，验证Linker理论，揭示Smad蛋白在胃癌细胞中分子机制及双向作用的关键差异基因； 建立胃癌移植瘤模型，研究Smad2/3蛋白不同表达对胃癌生长和转移影响，寻求下调胃癌TGF-β/Smad通路中关键靶点。 检测胃癌不同阶段中Smad蛋白的表达变化，分析其变化规律，明确起主导作用Smad蛋白： 胃癌组织，胃癌旁正常组织： TGF-β，Smad2、Smad3、p-Smad3(S204)、p-Smad3(S208)、p-Smad3(T179)、p-Smad2(T220)、p-Smad2（S245/250/255）； 通过胃癌细胞株模型，在细胞分子水平上分析TGF-β/Smad通路的网络调控关系，验证Linker理论，揭示Smad蛋白在胃癌细胞中分子机制及双向作用的关键差异基因； 选择胃癌细胞MGC-803,BGC-823以及SGC-7901； WB本底检测linker区域蛋白的表达linker区域的Smad2、Smad3、p-Smad3(S204)、p-Smad3(S208)、p-Smad3(T179)、p-Smad2(T220)、p-Smad2（S245/250/255）； TGF-β对胃癌细胞的增殖的影响