黄曲霉菌株的分离鉴定及产毒能力分析.pdfVIP

2012年6月 中国粮油学报 V01．27．No．6 oftheChineseCerealsandOilsAssociation Jurk2012 第27卷第6期 Journal 黄曲霉菌株的分离、鉴定及产毒能力分析 杨生瑞1’2 屈凌波1 孙长坡2 沈 晗2 沈 瑾3 伍松陵2 (河南工业大学生物工程学院1，郑州450001) (国家粮食局科学研究院2，北京100037) (农业部规划设计研究院农副产品加工研究所3，北京100126) 摘要对几株从发霉粮食中分离出的黄曲霉菌菌株进行形态学和分子生物学鉴定，并进行发酵培养和 产毒能力的HPLC测定。结果表明：试验分离菌株均为黄曲霉茵株且含有黄曲霉毒素产生的关键基因aflR；黄 曲霉菌株之间产毒能力差异巨大：黄曲霉菌株3．4408产毒量最高，黄曲霉菌株HDWS产毒量最低，黄曲霉菌 AFGl、AFG2，黄曲霉菌株HDWH只产生黄曲霉毒素AFBl、AFB2。 关键词黄曲霉茵黄曲霉毒素够R基因 高效液相色谱 中图分类号：Q93—3l文献标识码：A 文章编号：1003—0174(2012)06一0110一06 08：44 网络出版时间：2012一04—27 的最高限量标准以保障消费者的健康。中国规定了 黄曲霉毒素(Aflatoxin，AF)是所有真菌毒素中 对环境污染最严重，对人畜危害最大且毒性最强的 除玉米、花生及其制品外，绝大多数食品中的黄曲霉 真菌次级代谢产物。黄曲霉毒素既有很强的急性毒 毒素AFBl的含量均不超过5P-g／kg；欧盟规定农产 性，导致肝脏坏死出血，使免疫系统受损，引起蛋白 质营养不良症并导致儿童发育受阻，也有明显的慢 4 性毒性引起肝癌，并具有致癌、致畸、致突变作用，对 AFG2)的最高限量为15斗g／kg。 人、家畜和家禽的健康威胁极大，因此受到世界范围 黄曲霉毒素生物合成过程非常复杂，共涉及2l 的广泛关注。研究表明有7种曲霉属真菌可产黄曲 步酶促反应HJ。参与黄曲霉毒素合成的绝大多数基 因聚集于一个特定的基因簇中，由基因簇中各个基 霉毒素，分别为：AspergiUus加t见岱，A．parasitieus，A．no— 因转录和翻译而成呤1。基因簇现象在次生代谢产物 mitts。A．Pseudot—amarli，A．bombycis，A．ochraceoroser坫 及一种分离自西非的未定名分类元，最主要是由黄 合成中比较常见旧1。基因成簇存在也是黄由霉毒素 J。 合成途径等次生代谢途径的重要调控机制之一【7 曲霉(Aspergillusflavus，A．flavus)和寄生曲霉(Asper- 黄曲霉毒素生物合成途径的调节基因aflR在黄曲霉 gillusparasiticus，A．paras—iticus)以玉米、花生和坚 果等农作物及其制品为主产生的一类剧毒且致癌的 毒素产生过程中具有十分重要的作用，棚基因的表 达产物AflR蛋白是一个锌簇转录因子，能够开关黄 代谢产物¨‘3]，主要包括：黄曲霉毒素Bl(Aflatoxin 曲霉毒素途径的其他基因转录，是黄曲霉毒素合成的 B1，AFBl)、黄曲霉毒素B2(AflatoxinB2，AFB2)、