黄杨宁及结构改造衍生化合物与舒血管作用研究.pdfVIP

摘 要 黄杨宁，亦称环维黄杨星D或环常绿黄杨碱D （Cyclovirobuxine D，CVB-D ），是从 黄杨属植物小叶黄杨及其同属植物中提取出来的一种生物碱。CVB-D化学结构属于孕甾 烷的衍生物，分子式为C H N O 。现代药理学研究表明，CVB-D具有抗心肌缺血、抗 26 46 2 心律失常、增强心功能和降低主动脉压力等作用。临床上CVB-D主要用于治疗缺血性心 脏病、心律失常、高脂血症、心功能不全、脑动脉硬化供血不足以及调节血压等。尽管 CVB-D具有较好的药效学作用，但因其生物利用度较低、安全范围较窄且溶解性较差， 使其临床应用受到很大的限制。为了提高生物利用度、增强CVB-D 的药效、提高治疗指 数、改善脂水分配系数以增强水溶性，研究者在CVB-D母环的基础上对其进行了结构修 饰和改造。血管扩张作用是CVB-D抗心肌缺血作用的重要机制。因此，本研究主要从血 管张力调节角度比较了黄杨宁（CVB-D ）及其结构改造衍生化合物（CVB-D1、CVB-D2 和CVB-D3 ）对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用，以筛选CVB-D结构改造衍生物的药用 价值，并探讨其可能的作用机制。 氯化钾（KCl ）或去氧肾上腺素（PE ）是较为常用的制备血管收缩模型的工具药。 高浓度钾离子通过开放电压依赖性钙离子通道（VDCC ）介导细胞外钙离子内流而使平 滑肌收缩；PE可激活受体活化的钙离子通道（ROCC ）促使细胞外钙离子内流并通过增 加三磷酸肌醇（IP ）的生成，从而激活肌浆网膜的特异性IP 受体通道，继而引起细胞 3 3 内Ca2+储库释放增加从而导致血管收缩。 为了观察CVB-D及其结构改造衍生化合物对KCl或PE收缩血管过程中收缩张力的 维持的影响，本研究采用KCl或PE预收缩血管环模型，观察并比较CVB-D及其改构化合 -5 -4 -1 物（1×10 ~ 6×10 mol·L ）对血管的舒张作用。结果发现，在给药浓度范围内，CVB-D 与CVB-D3对KCl或PE预收缩血管环的舒张作用呈剂量依赖性，且CVB-D3舒张预收缩血 管的最大效应强于CVB-D ；为了进一步观察CVB-D或CVB-D3对收缩血管过程中收缩张 力的生成是否也有抑制作用，将血管环与6×10-4 mol·L-1 CVB-D或CVB-D3预孵育，观察 并比较二者对KCl或PE收缩血管浓度-效应曲线的影响。发现CVB-D或CVB-D3预孵育 后，均可以抑制KCl或PE收缩血管的作用，使其最大效应减小，量效曲线右移，且CVB-D3 的抑制作用强于CVB-D 。提示二者既可以抑制血管收缩过程收缩张力的维持，也可以抑 XI 制血管收缩过程收缩张力的生成，并确定CVB-D3为具有较强的血管舒张作用的CVB-D 结构改造衍生化合物。 对于筛选出来的舒血管作用较强的化合物CVB-D3，在其舒张预收缩血管环或者抑 制血管环的收缩作用过程中，我们发现CVB-D3对内皮完整血管环的作用均强于去内皮 血管环，表明CVB-D3 的血管舒张作用部分呈内皮依赖性的。内皮介导的血管舒张作用 很大程度上依赖于NO和前列环素（PGI2 ）等内皮舒张因子（EDRF ）的生成以及内皮超 极化因子（EDHF ）介导的超极化反应。本研究采用非选择性NO合酶抑制剂L-NAME 、 可溶性鸟苷酸环化酶抑制剂ODQ或环加氧酶抑制剂Indo与内皮完整的血管环预孵育后， 观察其对CVB-D3舒张PE预收缩血管环作用的影响，以探讨CVB-D3 的血管舒张作用与 NO 或cGMP 以及前列腺素类物质生成的关系。结果表明，内皮完整血管环预孵育 L-NAME 、ODQ 30 min后，与对照组相比，CVB-D3 的剂量-效应曲线受到明显抑制，但 CVB-D3 的最大舒张作用不受影响，提示CVB-D3 的血管舒张作用可能与促进内皮释放与 合成NO有关，同时可能还通过NO-cGMP通路激活平滑肌细胞的可溶性鸟苷酸环化酶从 而使cGMP产生增多而舒张血管；而Indo与内皮完整血管环预孵育30 min后，对CVB-D3 的舒血管作用没有抑制作用，提示CVB-D3 的血管舒张作用可能与前列腺素类物质的生 成无关。 平滑肌细胞 （SMC）的超极化是产生舒张反应的一种主要方式，很多内皮源的因子， 如NO等能够通过激活不同种类的K+通道使血管平