外源蛋白在巴氏毕赤酵母中高效表达的策略.pdfVIP

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2017-08-21 发布于重庆
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外源蛋白在巴氏毕赤酵母中高效表达的策略.pdf

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外源蛋白在巴氏毕赤酵母中高效表达的策略.pdf

22 3 ( ) Vol. 22 No . 3 200 1 9 Journal of Jishou University ( Natural Science Edit ion) Sept . 2001 1007- 2985( 2001) 03- 0040 - 05 聂东宋, 梁宋平, 李敏 ( , 410081) 高效表达外源蛋白, 在理论和实践上特别是在生物制药中具重要意义, 巴氏毕赤酵母( Pichia pastoris) 是表达外源蛋白最理想的真核表达系统之一. 影响外源蛋白在P. pastoris 中表达的因素很多, 主要包括外源基因自身的特性载体宿主细胞几个方面, 了解和灵活运用它们的联系, 助于获得外源基因在P. pastoris 中的高效表达. 巴氏毕赤酵母; 外源蛋白; 高效表达 Q75 A ( P. pastoris) , . , ( 1) . , , , 12 g/ L[ 1] , . ( 2) . , , . ( 3) . P. pastoris a- , , 10 g/ L, . P. pastoris , , - cryptogein 1~ 5 mg/ L[ 2] , AFP 5 mg/ L[ 3] , [ 4] , HIV . , , [ 5] , , AOX 1 , AOX 1 , . . , , , . , P. pastoris . 1 11 A+ T 4 . A+ T , ATTATTTTATAAA Caro 1A Scorer[ 6] ( HIV) gp120 , gp120 . , P. pastoris HIVENV . [ 4] , A+ T , A + T 30% ~ 50% 2001- 0 8- 05 ( ( 1967- ) , , , , . 3 , 41 , CareJJ[ 1] C . 12 , . , tRNA , . [ 7] [ 8] , 61 25 . Pichia pastoris 28 , P. pastoris 19 . Saccharomyles Cervisiae Kluyveromyles lactis , . [ 9] GAG S. cerevisiae K . lactis GAA . P. Pastoris , 0 , 37 . 13 mRNA5( 5- UTR) 5- UTR . UTR 40S , , 5- UTR mRNA . Aox 1 5- UTR 114 nt A+ , , , mRNA 5- UTR Aox 1mRNA5- UTR [ 10] , . Sreekrishna ( HSA) mRNA5 Aox 1 , HSA 50 , E [ 11] ( CTSE) 5- UTR . 5- UTR AUG , mRNA , AUG , . 2 P. pastoris 21 1) . , ( pPIC3) , , pPIC9, PHIL - D, PA0