T—DNA标签在植物基因克隆和功能分析中的应用.pdfVIP

西北 植物学报 ．2006，26(5)：1066 1070 Acta Bot．Borea1．一Occident．Sin 文章 编号2006)051066—05 T—DNA标签在植物基 因克隆和功能分析中的应用 侯雷平 ，李梅兰 (山西农 业大学 园艺学 院，山西太 O30801) 摘 要 ：存植物功能基闪组学的研究中，插入突变 成为迅速识别和研 究标签基 因的一个有效遗传工具 。本文介绍 了T—DNA 标签的概念及应用fji提『，详细论述 rTDNA 标签在大规模植物基 因功能分析 中的应用 以及使用启动 子和增强子诱捕技术分离时空特异性启动子和表达基冈．另外还分析 r利用其特殊形式激活标签进行基因克隆和 功能分析 的优越性 ，并展 rTDNA标签的应用 Iji景『 。 关键词 ：植物 ；T—DNA标签 ；突变体；基因克隆；功能分析 中图分类号：Q789 文献标识码 ：A ApplicationsofT—DNA Tagging inGeneCloningand FunctionalAnalysisofPlants HOU I．ei—ping。I．IMei—lan (CollegeofHorticuhure，ShanxiAgricuhuralUniversity，raigu，Shanxi030801，China) Abstract：Inthegenomicstudiesofplants，insertionalmutagenesishasbecomeaquick tooltoidentifyand studytaggedgenes．ThepaperintroducestheconceptionsandapplicationpreconditionsofT—DNA tagging。 discussesindetailsthelarge—-scaleapplicationinfunction analysisofplantgenesand temporallyandspa—— tiallyspecificpromoterandexpressiongenesintheisolation bypromoterand enhancertrapping．In addi— tion，itdiscussestheadvantagesofactivationtagging，aspecialtypeofT—DNA tagging，ingenecloningand functionanalysis，andenvisagestheapplicationprospectofT—DNA tagging． Keywords：plant；T—DNA tagging；mutant；genecloning；functionanalysis T—DNA标签就是利用农杆菌介导的遗传转化 1 T—DNA标签应用的前提 方法将外源 T—DNA转入植物 ，以T—DNA作为插 入突变原或分子标记，来分离或克隆因为插入而失 随着各种生物技术手段的使用及模式植物拟南 活的基因并研究基因功能的方法。由于 T—DNA左 芥 。。、水稻基因组计划 3“的实施 ，许多植物的基因 右边界及 内部的基因结构是 已知的，因此对获得的 序列 已经被测到，但有关基因功能的了解还远远落 转基因插入突变体就可以通过已知的外源基因利用 后于此，因此基因功能研究就成为一项艰 巨而迫切 各种 PCR策略进行突变基因的克隆和序列分析 ，对 的任务。 比突变的表型进而研究基因的生理生化功能。这种 在植物的基因克隆和功能分析研究 中，有许多 方法已经成为反向遗传学研究的一种主要策略。 种策略，利用突变体就是其 中之一 ，但天然的突变