4种归肺经中药对肺热证小鼠TLR2,NF-κB表达变化的研究.pdfVIP

第 39卷第 17期 申圈中药杂志 Vo1．39，Issue 17 2014年9月 ChinaJoum 。IofChnese aterlaMedica September，2014 4种归肺经中药对肺热证小 鼠TLR2，NF．KB 表达变化的研究 杨萍，金素安，车立娟，何世民，袁颖 (上海中医药大学，上海201203) [摘要] 目的：研究麻黄、干姜、黄芩、桑白皮4味归肺经中药对肺热证小鼠肺组织TLR2，NF—KBp65表达的影响，探讨这 4味中药干预肺热证的作用机制。方法：将 100只健康KM种小鼠随机分为正常对照组、模型组、麻黄、干姜 、黄芩、桑白皮组 (20，10g·kg )，鼻腔滴人肺炎链球菌菌液建立小鼠肺热证模型 ，分别给予不同中药治疗，应用免疫组化法检测肺组织 TLR2，NF—KBp65蛋白含量，Real-timePCR法检测肺组织TLR2，NF—KBp65mRNA表达水平。结果：与对照组比较，模型组 TLR2，NF—KBp65蛋白含量升高 (P0．01)，mRNA表达上调 (P0．01或P0．05)；与模型组比较，麻黄高、低剂量组 、干姜低 剂量组、黄芩高剂量组TLR2蛋白表达降低 (P0．05或P0．01)；麻黄高、低剂量组、干姜低剂量组、黄芩高、低剂量组、桑 白 皮高、低剂量组NF—KBp65蛋白含量降低(P0．05或P0．01)；麻黄高、低剂量组、干姜高、低剂量组、黄芩高剂量组、桑白皮 高剂量组TLR2mRNA表达下调(P0．01或P0．05)。结论：麻黄 、干姜、黄芩 、桑白皮可能通过下调TLR2，NF—KBp65蛋白 及 mRNA表达，介导TLR2／NF—KB炎症信号通路，从而减轻小鼠肺热证肺组织损伤。 [关键词] 麻黄；干姜 ；黄芩；桑 白皮；肺；Toll样受体 2；核因子一KB TLRS是机体识别病原微生物并激活免疫细胞 1．2 菌株来源 肺炎链球菌 (Streptococcuspneu． 产生免疫防御的天然免疫受体，它们能够特异性地 moniae，S．pn)菌株购 自CMCC，菌号31001．9a。 识别病原微生物，通过偶联信号传导途径，引起一系 1．3 药物 麻黄、干姜、黄芩、桑白皮饮片均购 自上 列的炎症反应 ¨J。TLR2主要表达于单核细胞，巨 海康桥饮片厂。经上海中医药大学生药学教研室鉴 噬细胞，TH1，TH2及部分消化道上皮细胞等，可对 定，麻黄为麻黄科植物草麻黄 EphedrasinisaStapf的 革兰阳性菌菌体成分进行模式识别 J。NF．KB是一 干燥草质茎，产地河北，批号 120416；干姜为姜科植 种能被致炎性细胞因子等激活的转录因子，以非活 物姜 ZingiberofficinaleRosc的干燥根、茎，产地 山 化的形式存在于细胞胞浆中，当其受到刺激被激活 东，批号 120425；黄芩为唇形科植物黄芩 Scutellaria 后，可转移至胞核中 J。本文通过考察肺热证小鼠 baicalensisGeorgi的干燥根，产地河北，批号 120328； 肺组织中TLR2和核因子．KB的表达情况，探讨麻 桑 白皮为桑科植物桑MorusalbaL的干燥根皮，产 黄、干姜、黄芩、桑 白皮4味药物影响肺热证的作用 地浙江，批号 120109。中药水煎液制备：麻黄、干 机制。 姜、黄芩、桑 白皮各中药均水煎2次，滤液合并后浓 1 材料 缩至生药 1g·mL～。 1．1 动物 健康 昆明种小鼠100只，清洁级，雌雄 1．4 试剂 TLR2一抗 (批号 286379)，NF．KBp65 各半，体重 18—20g，由上海斯莱克实验动物有限责 一 抗(批号78611P114)，SABC免疫组化染色试剂盒 任公